APP下载

携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡的制备

2020-07-08伍巧玲丁云川冉海涛王志刚王庆慧

云南医药 2020年3期

伍巧玲,丁云川,冉海涛,王志刚,陈 剑,王庆慧,张 键

(1.昆明医科大学;2.昆明市延安医院 超声医学科,云南 昆明 650051;3.重庆医科大学超声影像学研究所 重庆 400010)

目前基因治疗用于临床实验研究越来越多,而输送基因入体内的方法较多,但都存在一定的缺陷,如在输送途中基因被降解,基因不稳定,输送载体可能会引起免疫反应等。将超声造影技术与基因治疗结合起来,能显著提升基因的转染效率[1],充分发挥治疗疾病的作用。超声造影剂可作为一种安全有效的基因载体,靶向精准治疗,延长了造影剂在病区滞留时间,特异性增强了显影效果,在诊断疾病的同时,又能击破造影剂精准释放基因,促使基因进入细胞内转染,有着广阔的临床应用前景。

阳离子脂质微泡造影剂通过电荷孵育法与带负电荷的基因相连输入体内,实时观察造影剂的显影途径,使用低强度聚焦超声技术靶向辐照击破微泡,释放基因,并促使其转染,较高的提高了基因转染效率[2-4]。

资料与方法

一、药品和试剂 二棕榈酰磷脂酰胆碱、氨基甲酰基胆固醇,二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000,全氟丙烷气体,PBS缓冲液,甘油。

二、仪器 Malvern激光粒径、电位测量仪;银汞胶囊调合器;投射式电子显微镜;光学显微镜、倒置荧光显微镜;紫外线分光光度计;电子天平;微量加样枪;血球计数板。

三、实验方法 1.阳离子脂质微泡的制备:将一定比例的二棕榈酰磷脂酰胆碱、氨基甲酰基胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺- 聚乙二醇2000、甘油、PBS、三氯甲烷、全氟丙烷等经旋转蒸发、机械振荡,制备出阳离子脂质微泡。……

登录APP查看全文