（湖南省动物疫病预防控制中心，湖南长沙 410014）

繁殖障碍性疫病是以母猪流产，产死胎、弱胎、木乃伊胎，以及不孕不育为主要特征的一类疫病，常见的有猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）、猪圆环病毒病（PCVD）、猪细小病毒病（PPI）等。这几种病的病原临床多表现为混合感染[1-2]，也可通过种猪垂直传播至下一代，造成更大范围的感染[3]，给养猪业造成巨大经济损失。自非洲猪瘟在我国暴发以来，种猪已成为当前养猪业的稀缺资源，如何防控非洲猪瘟和主要繁殖障碍性疫病，提高母猪健康水平和生产性能，是种猪场急需解决的问题。当前，湖南省共有原种猪场17个，一级扩繁场131个，其他类型种猪场300 余个。为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性疫病流行情况，结合我国原种猪场的监测要求，自2015年开始，对省内5个原种场进行了CSF、PRRS、PR、PCVD、PPI 等主要繁殖障碍性疫病的病原和抗体监测，以期为全省种猪主要繁殖障碍性疫病防控及净化策略制定提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检样品 根据农业农村部畜牧兽医局关于《种畜禽场主要动物疫病监测实施方案》要求，并结合湖南省原种猪场自身情况，自2015 起，在湖南省原种猪场，选择存栏量在5 000 头以上的5个大型原种场（A、B、C、D、E），每年6—8 月进行一次采样检测。样品来源原则上每个原种猪场不少于3 栋猪舍的猪只，其中种公猪5 头、经产母猪25 头（1～2 胎5 头、3～4 胎10 头、5～6 胎10 头）、后备母猪10 头（40～60 kg 5 头、90～110 kg 5 头）。每个原种猪场共计采集40 份猪血清及相对应的40份扁桃体样本。截至2019年，共在5个原种猪场，采集猪血清及扁桃体样品各1 000 份，-20 ℃以下保存待检。

1.1.2 病原学检测试剂 猪瘟病毒（CSFV）通用型实时荧光RT-PCR 检测试剂盒（50 头份），猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）实时荧光PCR 检测试剂盒（50 头份），猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）通用型RT-PCR 检测试剂盒（50 头份），PRRSV Nsp1594-1680 变异株RT-PCR 检测试剂盒（50 头份），猪细小病毒（PPV）实时荧光PCR 检测试剂盒（50 头份）：均购自于北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。

1.1.3 血清学检测试剂 CSFV 抗体检ELISA 测试剂盒、PRV-gB 抗体ELISA 试剂盒、PRV-gE 抗体ELISA 试剂盒，均为美国IDEXX 公司生产；PRRSV 抗体ELISA 试剂盒，法国LSI 公司生产。

1.1.4 主要仪器设备 核酸提取仪、PCR 仪、荧光PCR 仪、组织研磨仪、酶标仪、离心机等。

1.2 方法

1.2.1 病原学检测 将采集的扁桃体样本捣碎，提取病毒核酸。采用实时荧光定量方法，检测组织样本中CSFV、PCV2、PPV 核酸。体系配置、反应条件及判定标准，参照试剂盒说明书进行。对病毒核酸先使用通用型RT-PCR 扩增PRRSV，对阳性样品再用RT-PCR 进行HP-PRRSV（变异株）扩增，根据结果判定感染类型；在用PRVgE基因缺失疫苗免疫的猪场，检测PRV-gE 抗体，若呈阳性，则判定为PRV 野毒感染，即病原阳性。试验操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.2 血清学检测 所有采集的血清样本，利用ELISA 方法检测血清中CSFV、PRRSV、PRV-gB抗体，参照各试剂盒说明书进行操作及判定标准。本调查未进行PPV、PCV2 免疫抗体检测。

2 结果与分析

2.1 病原学监测

2.1.1 不同年份感染情况 2015—2019年，5个原种猪场均未检测到CSFV 核酸阳性，部分或全部猪场检测到PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV 核酸阳性（表1），个体阳性率分别为2.1%、1.3%、9.5%、22.1%、28.9%（表2）。不同年份的病原感染情况存在一定差异，其中PRRSV 与HP-PRRSV 核酸阳性率整体呈下降趋势，而PRV、PCV2、PPV 整体呈波动状上升趋势，且PCV2 和PPV 污染面广，感染较严重。

表1 不同年份病原学阳性场统计结果

表2 不同年份病原学阳性率统计 %

2.1.2 不同病原感染情况 由表2 可见：5个种猪场连续5年未检测到CSFV 核酸阳性，说明CSF基本达到了免疫无疫状况。PRRSV 和HP-PRRSV感染反复出现，2017年和2019年核酸检测均为阴性，其他年份均检测到阳性。PRV 感染率呈波动状变化，2015、2016 和2018年核酸阳性率在2.5%以下，而2017 和2019年核酸阳性率陡增至20%以上。PCV2 和PPV 核酸阳性率居高不下，在14.5%～41.0%之间波动。

2.1.3 不同猪场感染情况 5个原种猪场连续5年的病原学检测结果（表3）显示：A 场PRRSV 核酸和PRV-gE 抗体连续5年保持阴性，HP-PRRSV 偶有检出，PCV2 和PPV 阳性率在0～32.5%之间波动；B 场病原阳性率整体较低，但个别年份高发，如2019年PRV-gE 阳性达到50.0%，PCV2阳性率达到52.5%，2016年PPV阳性率高达82.5%；C 场PRRSV 阳性率较低，但PRV、PCV2、PPV 核酸阳性率普遍较高；D 场PRRSV 连续5年检测为阴性，PRV-gE 在2017 和2019年突然转阳，阳性率在50%以上，PCV2 和PPV 阳性率高低起伏，2019年PPV 阳性率高达95.0%；E 场PRRSV 和PRV 连续5年检测均为阴性，而PCV2 和PPV 阳性率在10.0%～57.5%之间波动。

表3 5个原种猪场连续5年的病原学阳性率统计 %

2.2 血清学监测

对所有采集的1 000 份血清样品进行了CSFV、PRRSV、PRV-gB 免疫抗体检测。结果（表4）显示，CSFV、PRRSV、PRV-gB 抗体合格率分别为96.9%、99.7%、98.7%，均达到农业农村部要求的70%以上的标准，表明各猪场3种病原的抗体保护水平良好。

表4 不同年份原种猪场3种病原的免疫抗体阳性率统计 %

3 讨论

3.1 CSF

近年来，我国实施CSF 强制免疫等一系列综合防控措施，使得该病得到有效控制，CSF 净化工作正逐步推进。2011—2018年，王琴等[4]开展CSF 病原学监测，发现健康猪群带毒率从9.26%下降到0.70%，全国发病率和死亡率一直处于下降状态，表明我国CSFV C 株疫苗对我国现有的流行毒株提供了有效保护。本次监测发现，2015—2019年湖南省5个种猪场CSF 病原学检测均为阴性，且每年免疫抗体水平均在96.0%以上，基本达到了免疫无疫状态，可适时开展CSFV 净化根除。

3.2 PRRS

我国目前对PRRS 的防控主要采取疫苗免疫。但由于PRRSV 变异快，不同地区流行毒株存在一定差异，防控效果不理想，病毒感染长期存在。宋玉慧[1]对2013—2016年河南省规模猪场采集样本进行病原学调查，发现PRRSV 阳性率为20.6%；王倩等[5]对2015—2018年安徽省定点猪场主要疫病病原进行检测，发现PRRSV 平均阳性率为26.9%。本监测从2015年开始对湖南省5个原种猪场开展连续5年的病原检测，结果发现PRRSV与HP-PRRSV 阳性率分别为2.1%和1.3%，远低于前面二者的报道，表明湖南省种猪场通过免疫监测等综合控制措施，使PRRS 得到了有效控制。但本监测也发现，不同年份均有猪场出现PRRS 疫情反弹现象，需引起重视。吴佳俊等[3]对我国种猪场主要垂直传播疫病进行动态监测发现，2015年PRRS 疫情出现了反弹，场阳性率与个体阳性率出现了大幅上升。

3.3 PR

PR 是我国目前猪群疫病优先净化的病种之一，且已取得了一定的防控成效。本次监测发现，湖南省原种猪场中，PRV-gE 抗体转阳与野毒感染情况仍然存在。林琳等[6]对福建省不同规模猪场PRV 野毒感染调查发现，种猪场PRV-gE个体阳性率为30.2%；占松鹤等[7]对安徽省规模化种猪场开展PRV 血清学调查，发现PRV-gE个体阳性率为18.9%；朱小甫等[8]对2013—2017年陕西省PRV的分子流行病学调查显示，发病猪群中PRV 野毒感染率达到了72.3%。本监测发现的PRV-gE个体阳性率为9.5%，远低于上述报道，但仍有3个种猪场反复出现gE 抗体阳性，部分场阳性率高达50%以上，因此需要加强生物安全控制，防止野毒感染。

3.4 PCVD

PCVD 已经成为危害我国养猪业的主要疫病之一。其病原PCV2 污染面广、感染率高，引起的危害最大。近年来，PCV3 在我国猪群中也开始出现，因而增加了该类疫病的防控难度，已引起了学者的广泛关注。何长生等[9]对安徽省部分猪场健康猪群猪圆环病毒感染情况进行调查发现，PCV2场阳性率与个体阳性率分别为91.7%和67.4%；蒋新华等[10]对2013—2017年江西省10个地区进行PCV2 检测，发现个体阳性率为56.4%。本次监测发现，湖南省5个种猪场普遍存在PCV2 感染，个体阳性率为22.1%，与其他地区相比虽然个体阳性率略低，但感染也很普遍，应在生产过程中重视该病防控。

3.5 PPI

引起PPI 的病原PPV 主要感染初产母猪，引起流产、产死胎等繁殖障碍，但母猪本身无明显临诊症状，容易被忽视。目前国内猪场PPV 感染比较严重，污染面广。孙泉云等[11]对2015—2017年上海市规模猪场开展PPV 病原监测，发现总阳性率为8.7%；吴佳俊等[3]对我国种猪场开展动态监测发现，PPV 场阳性率与个体阳性率分别为95.6%和33.6%。本监测发现，湖南省种猪场PPV 感染普遍，个体阳性率为28.9%，与全国检测数据基本持平，但高于上海市规模猪场数据，表明种猪场的PPV 感染较严重，需加强控制与净化。

4 结论

对湖南省5个大型原种猪场连续5年的监测表明：各种猪场的CSF 得到了有效控制，基本达到了免疫净化状态。而部分原种猪场仍存在不同程度 的PRRSV、HP-PRRSV、PRV、PCV2、PPV 感染，其中PRRSV、HP-PRRSV、PRV 感染反复出现，PCV2 与PPV 感染率居高不下，病毒污染面较广。因此，需通过免疫、监测、生物安全控制等综合措施，加强这些疫病的控制与净化。