温琳琼 姜萍 师秀艳

【摘要】 目的：对一并多指（趾）家系进行基因突变检测，以期发现致病基因突变。方法：提取家系可追溯到的并多指（趾）患者外周血的基因组DNA。以特异的引物经聚合酶链反应扩增HOXD13基因的两个外显子及外显子/内含子交界区域，然后对PCR产物直接进行测序。BLAST比对分析家系患者HOXD13基因序列。突变导致的氨基酸改变位点在不同物种的保守性分析。结果：BLAST比对分析发现患者突变为c.64G>T（p.A22S），该突变位点在不同生物中高度保守。结论：c.64G>T（p.A22S）可能为该家系的致病突变。

【关键词】 肢端畸形 突变筛查 并多指（趾）畸形

[Abstract] Objective： To find out the mutation of pathogenic gene， the gene mutation of a pedigree with synpolydactyly was detected. Method： Genomic DNA from peripheral blood of patients with traceable polydactyly was extracted. Two exons and exon / intron junction regions of HOXD13 gene were amplified by polymerase chain reaction with specific primers， and then the PCR products were sequenced directly. BLAST was used to compare the HOXD13 gene sequence of patients with genebank sequence. Evolutionary conservation of amino acids flanking the mutations were analyzed. Result： The comparative analysis of BLAST revealed that the patient was mutated to c.64G > T （p.A22S）， which was highly conserved in different organisms. Conclusion： c.64G > T （p.A22S） may be a pathogenic mutation in this family.

并多指畸形（synpolydactyly， SPD）是一種常染色体显性肢体畸形，通常由3/4指和4/5趾并指组成，3/4并指蹼内有一个中心重复指。SPD（OMIM 186000），是由HOXD13基因突变引起的，HOXD13是肢体发育中起关键作用的转录因子。HOXD13有两个外显子：外显子1编码含15个丙氨酸残基的多聚丙氨酸链，外显子2编码含有60个氨基酸残基的同源盒结构域（残基268-327）。通过同源结构域结合特定的DNA序列，HOXD13直接调节早期肢体前-后轴和相关的关键基因[1]。HOXD13蛋白的多聚丙氨酸链延展突变和同源结构域错义突变都可引起SPD表型。本研究中分析了一个中国北方SPD家系，以HOXD13为候选致病基因对先证者进行了基因突变筛查，以期发现突变位点，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 家系临床资料 于沈阳医学院中心医院手外科收集一并多指（趾）家系，通过直接检查或家系成员口述，了解患者的临床表现及其遗传学特征，绘制系谱图;与患者及其家属签署“知情同意书”，并经沈阳医学院学术委员会批准，对可追溯到的患者进行体格检查和足部外观拍照，并采集患者外周静脉血2 mL，血样-70 ℃保存备用。