钟佳莲，林祚贵，阮国荣

(福建农业职业技术学院动物科学学院，福建 福州 350119)

盐酸沃尼妙林是国家二类新兽药，具有抗菌活性强、抗菌谱广的特点。其作用机制为通过与病原微生物核糖体上的50S亚基结合，抑制病原微生物蛋白质的合成，导致病原微生物死亡[1-6]。该药可用于预防和治疗由肺炎支原体引起的猪支原体肺炎，也可用于治疗猪痢疾，但获批仅用于猪和兔，尚未获批应用于家禽[7]。有研究显示，盐酸沃尼妙林对鸡慢性呼吸道病和鸡滑液囊支原体病有很好的疗效[8-11]。但目前为止，该药对于鸡的安全性影响，国内还未见相关报道。为此，本研究旨在开展盐酸沃尼妙林预混剂对鸡的安全性评价试验，以期为鸡临床用药提供可靠依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验药物

盐酸沃尼妙林预混剂(易可能，批号：1711001)，由齐鲁晟华制药有限公司提供；抗凝剂EDTA-2K(批号：2016年6月10日)，由天津市致远化学试剂有限公司生产。

1.1.2 试验动物

1月龄广东黄麻鸡，购自莆田某鸡场，共64只，雌雄各半。

1.2 试验动物分组与处理

选取健康活泼、雌雄各半的64只1月龄广东黄麻鸡于福建农业职业技术学院动物房进行观察1周，期间饲喂不含抗生素的全价饲料，每天给料2次。1周后经临床检测，鸡群健康无异常现象，再进入正式试验。

试验鸡随机分为4组，每组16只，雌雄各半，分别为单倍(10 mg/kg)、3倍(30 mg/kg)、5倍(50 mg/kg)剂量混饲10%盐酸沃尼妙林预混剂给药试验组及空白对照组，每日给药1次，连续用药21 d。每天观察、记录试验鸡群的饮水、采食、呼吸、精神状态及排泄等健康状况。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长性能指标

分别于给药前和给药结束后对各组鸡逐只称重，计算平均增重和相对增重率。

1.3.2 血液生理、生化指标

所有组别鸡只分别在给药前1 d，给药结束后第14天逐只翼下静脉采血4 mL，用于血液生理和血清生化检测，并备份1份血清。

血常规检测指标包括：抗凝全血中的红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞体积(MCV)、白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、淋巴细胞(LYM #)、单核细胞(MON#)、粒细胞数(GRA#)、淋巴细胞百分比(LYM%)、单核细胞百分比(MON%)、粒细胞百分比(GRA%)、红细胞分布宽度-SD值(RDWSD)、红细胞分布宽度-CV值(RDWCV)、血小板压积(PCT )、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、 大血小板比例(P-LCR)等20项血常规指标。

血生化检测指标包括：血清中的肌酐(CREA )、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰基转移酶(GGTy)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)、尿酸(UA)、尿素(UREA)、总胆红素(T-BIL)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等11项血液生化指标。

1.3.3 病理组织变化

给药结束后7、14 d，每组随机选取4只鸡进行解剖取样。先肉眼观察有无病理变化，再取心、肝、脾、肺、肾等组织放入10%的中性福尔马林中固定。样品委托武汉赛维尔生物科技有限公司制作病理组织切片。

1.4 数据处理

试验数据用Excel 2003进行处理后，采用SPSS 17.0软件进行方差分析。数据用“平均数±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 临床表现

试验期间，对照组和用药组鸡只均未发生肉眼可见的中毒现象和病死情况，鸡只行动自由，精神状态良好，采食正常，粪便成形、无血便、绿便、稀便等异常现象。

2.2 生长性能

盐酸沃尼妙林预混剂连续混饲给药21 d，对照组、1、3、5倍使用剂量组各组间平均增重差异不显著(P>0.05)。详见表1。

表1 生长性能相关指标测定

评价指标 对照组 1倍使用剂量组 3倍使用剂量组 5倍使用剂量组平均初重/kg 0.60±0.020.61±0.030.59±0.020.61±0.02平均末重/kg 1.20±0.031.22±0.031.19±0.031.21±0.02平均增重/kg 0.60±0.030.61±0.040.59±0.030.60±0.03相对增重率/%99.77±7.4199.47±9.60100.09±6.3398.99±7.37死亡只数0000

2.3 血液生理指标

盐酸沃尼妙林预混剂经21 d连续混饲给药后14 d检测，对照组、1、3、5倍使用剂量组各组间血液生理指标差异不显著(P>0.05)，详见表2。

2.4 血液生化指标

盐酸沃尼妙林预混剂经21 d连续混饲给药后14 d检测，对照组、1、3、5倍使用剂量组各组间血液生化指标差异不显著(P>0.05)，详见表3。

2.5 组织病理

2.5.1 病理剖检变化

盐酸沃尼妙林预混剂停药7、14 d后，对照组及各使用剂量组鸡只心、肝、脾、肺、肾组织、皮肤组织等均未见肉眼可见的病理变化。

表2 盐酸沃尼妙林预混剂给药结束后14 d血液学指标结果

指标对照组1倍使用剂量组3倍使用剂量组5倍使用剂量组WBC/(×109·L-1)99.90±1.9099.90±4.5099.90±3.6099.90±5.20LYM#/(×109·L-1)68.80±3.7069.16±1.7770.20±1.2668.46±1.65MON#/(×109·L-1)8.07±1.898.62±1.088.29±0.838.00±0.77GRA#/(×109·L-1)22.37±1.3622.12±1.4422.19±1.1822.2±1.67LYM%/%68.87±3.7069.19±1.7969.62±1.2868.72±1.53MON%/%8.35±1.688.59±1.018.30±0.838.36±1.45GRA%/%22.55±1.3722.17±1.4622.09±1.2222.67±1.54HGB/(g·L-1)119.97±6.72120.94±9.20119.39±6.60119.88±7.50MCH/Pg49.83±1.7050.24±2.2049.43±3.6649.30±1.94MCHC/(g·L-1)465.5±15.58474.71±11.12460.11±17.22460.56±14.87RBC/(×1012·L-1)2.41±0.442.42±0.172.32±0.222.46±0.22MCV/fL108.37±2.86107.41±3.36106.86±2.68108.21±3.78HCT/%25.98±4.3325.66±1.9825.26±1.9025.44±2.00RDWSD/fL68.50±6.3567.43±4.6968.67±6.3268.89±5.13RDWCV/%15.82±1.2815.70±1.0615.70±0.9115.26±0.80PLT/(×109·L-1)166.67±7.06166.29±6.16166.00±7.79166.22±5.74PCT/%0.11±0.010.10±0.030.10±0.020.10±0.03MPV/fL7.35±0.457.09±0.157.95±0.377.10±0.30PDW/fL5.72±0.725.27±0.295.89±0.225.73±0.76P-LCR/%1.78±0.851.74±0.371.76±0.341.78±0.43

表3 盐酸沃尼妙林预混剂给药结束后14 d血液生化指标结果

指标 对照组1倍使用剂量组 3倍使用剂量组5倍使用剂量组TP/(g·L-1)39.67±1.6339.57±1.7239.67±1.8039.22±1.99ALB/(g·L-1)14.00±2.9014.00±2.2414.00±1.4114.22±2.71CREA/(μmol·L-1)178.67±16.00177.86±16.14179.56±17.66176.33±16.52GGTy/(Μ·L-1)22.50±2.7422.86±1.5722.33±2.0022.78±1.86T-BIL/(μmol·L-1)61.62±18.3162.90±20.6764.08±22.8862.74±22.58UREA/(mmol·L-1)1.67±0.821.57±0.791.56±0.731.67±0.71UA/(μmol·L-1)238.00±47.98239.86±42.83246.22±22.29241.89±47.62ALT/(U·L-1)18.67±7.2318.71±6.8517.56±6.9719.44±5.53AST/(U·L-1)180.00±51.47185.57±37.23187.78±39.19188.89±56.62TG/(mmol·L-1)0.48±0.080.44±0.100.43±0.100.50±0.07CHOL/(mmol·L-1)4.15±0.574.11±0.533.88±0.413.96±0.78

2.5.2 组织学检查

盐酸沃尼妙林预混剂停药7、14 d后，对照组及各剂量组鸡只心、肝、脾、肺、肾组织切片在光学显微镜下观察，均未见明显病变。其中停药14 d后的5倍剂量组各组织切片见图1。

A. 心；B. 肝；C. 脾；D. 肺；E. 肾

图1 5倍使用剂量组鸡不同组织显微镜检查(200×)

3 讨论

盐酸沃尼妙林为二萜类抗生素，抗菌活性强，抗菌谱广，在临床上主要用于预防和治疗猪由肺炎支原体引起的支原体肺炎，治疗猪痢疾，效果良好。同时，近年来鸡毒支原体引起的鸡慢性呼吸道疾病不断增加，由于临床常用药物使用频繁导致逐渐出现耐药现象，而盐酸沃尼妙林可溶性粉对鸡慢性呼吸道病有很好的疗效。

由于该药还未正式批准用于鸡，因此没有规定推荐剂量。我们通过查阅相关文献[8,12-13]，发现该药对鸡的研究通常为按体重10 mg/kg左右，每天1次给药。因此，本试验的单倍剂量设置为10 mg/kg，每天给药1次。经过临床试验，结果表明盐酸沃尼妙林对鸡无不良作用，安全性较好。但对于雏鸡还需进一步试验进行探讨。同时，建议改进该药的制作工艺并降低成本从而降低该药的价格，以便在临床上推广该药的使用。

综上，本研究进行了盐酸沃尼妙林对鸡的安全性试验评价，设置单倍、3倍、5倍使用剂量组和空白对照组，连续使用21 d，观察鸡临床表现，测定其增长情况、血液生理生化指标、病理组织变化等。结果显示，按照单倍、3倍、5倍使用剂量连续使用21 d，试验组与空白对照组相比，其临床表现、生长性能、血液生理生化指标和病理组织切片等均未见明显差异，这说明其对鸡无不良作用，安全性较好。