蔺晓源，邓 娜，龙红萍，夏旭婷，蔡 莹，刘富林*

（1.湖南中医药大学第一附属医院，长沙 410007；2.湖南中医药大学，长沙 410208）

腹泻型肠易激综合征（IBS-D）以反复发作的腹痛、腹泻为主要表现，属中医“泄泻”的范畴[1]。IBS-D的发病机制尚不明确，至今亦无最佳治疗方案，虽然不会严重威胁人体生命，但其症状迁延反复，对患者生活质量的影响远比器质性疾病更严重[2]。目前一致认为，脑肠轴调控紊乱在IBS-D的发病中起主要作用。促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）是脑肠轴在应激反应系统中重要的脑肠肽，CRF及其受体在胃肠道中广泛分布，并在IBS-D的发病中起关键作用[3]。四神丸是主治脾肾阳虚泄泻的经典名方，临床用于治疗IBS-D效果显著[4-5]。为了进一步明确四神丸发挥疗效的作用靶点，本研究观察了其对脾肾阳虚型IBS-D模型大鼠CRF的影响，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物与药物 SD大鼠40只，SPF级，雄性，体质量180～220 g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK（湘）2013-0004。饲养于SPF级实验动物房，饲养温度 21～25 ℃，湿度50%～70%。所有大鼠自由饮水、进食，每2天更换1次垫料。

四神丸[北京同仁堂天然药物（唐山）有限公司，国药准字Z13020656]，研碎后过筛，用蒸馏水配制，浓缩成0.732 g/mL浓度混悬液。得舒特（匹维溴铵片，法国苏威制药公司，注册证号H20120127），研碎后过筛，配制成1.523 mg/mL药液。番泻叶（购于湖南中医药大学第一附属医院中药药房，符合2015版《中国药典》标准）按100 g加沸水400 mL的比例，先浸泡30 min，再煮10 min，去滓，浓缩成1.0 g/mL水煎液。

1.2 主要试剂与仪器 大鼠CRF ELISA试剂盒（RD公司），CRF兔抗多克隆抗体（abcam），BCA 蛋白浓度测定试剂盒（Bio-Swamp），蛋白质Marker(Thermo)，逆转录试剂盒（TAKARA），PCR试剂盒（KAPA Biosystems）。……