刘冰洁，吴学苏

（1.南京中医药大学，江苏 南京；2.南京市中医院内分泌科，江苏 南京）

0 引言

随着人口体检意识的提高，使得越来越多的甲状腺疾病被检测出[1-5]。目前较多的研究报道已经明确WIP1、Ang2 等生物标记物在甲状腺乳头状癌组织中较高的染色阳性率[6-8]。有研究报道WIP1 含量与乳腺癌、食管癌等肿瘤的发生发展关系密切。Ang2是被证实的与肿瘤的发生发展、凋亡、周期等密切相关的微管相关蛋白，可反映肿瘤的增殖能力、分化能力，凋亡失衡，抑制肿瘤细胞的凋亡通路，促进肿瘤细胞的增殖分化。 本文检测WIP1、Ang2在不同类型甲状腺结节中的表达情况,并比较表达的阳性率与肿瘤大小、 是否发生淋巴结转移等临床特征的相关性。旨在为甲状腺结节及甲状腺乳头状癌的鉴别诊断提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 资料

收集2018 年4 月至2019 年12 月我院B 超检查确诊为甲状腺结节的患者，所有患者均在我院进行手术，根据甲状腺手术切除标本的病理类型，分为甲状腺肿34 例、甲状腺腺瘤30 例、乳头状癌36 例。甲状腺肿组患者中男17 例，女17 例，年龄38 岁～76 岁,平均年龄52.82±19.01 岁。甲状腺腺瘤组患者男16 例，女14 例，年龄36 岁～71 岁,平均年龄52.67±19.05 岁。乳头状癌患者中男21 例，女15 例，年龄35 岁～77 岁,平均年龄53.28±17.05 岁。

1.2 入选标准

（1）以“甲状腺结节”为第一出院诊断者。（2）参与本次研究前未接受过抗甲状腺药物治疗或放疗化疗者。（3）患者及家属知情同意,签署知情同意书。

1.3 排除标准

（1）主要脏器功能不全者。（2）其他部位恶性肿瘤者，如患有血液病、风湿免疫系统疾病者。（3）临床资料不完整缺项者。

1.4 研究方法

1.4.1 检测指标

在患者手术标本取得后，取 0.5cm×0.5cm×0.5cm 大小甲状腺结节组织，采用免疫组化 SP 法检测 WIP1、Ang2 蛋白。

1.4.2 检测方法

石蜡切片，脱蜡至水后采用H2O2 室温下孵育10min，磷酸盐缓冲液冲洗3 次，每次3～5min，8%的蛋白粉封闭液，封闭2h，倒去封闭液后加入一抗，4℃冰箱过夜,磷酸盐缓冲液冲洗3 次,每次3～5min,加入二抗,室温孵育20～30min,磷酸盐缓冲液冲洗3次，每次3～5min，加入辣根酶或碱性磷酸酶的标记物，室温孵育10min，磷酸盐缓冲液冲洗3 次，每次3～5min，滴加显色剂，复染，脱水，封片。

1.5 观察指标

分析100 例手术标本的病理类型；不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况；不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况。

1.6 统计学

采用SPSS 17.0 软件，计数资料采用（%）来表示，采用χ2检验，计量资料用表示，t 检验， P＜0.05 为差异有意义。

2 结果

2.1 不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况

不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况有明显差异，甲状腺癌WIP1 表达+++比例最高，三组间结果比较有差异（P＜0.05），见表1。

表1 不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况

2.2 不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况

不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况有明显差异，甲状腺癌Ang2 表达+++比例最高，三组间结果比较有差异（P＜0.05），见表2。

表2 不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况

3 讨论

目前，已经有报道证明WIP1、Ang2 与 肿瘤的转移、侵袭有密切联系，并有报道证实WIP1、Ang2 在甲状腺乳头状癌组织中高表达[9]。本次研究中基于上述研究结果进行进一步探讨。

首先在本次研究中，将不同病理类型甲状腺结节患者进行分组，分为甲状腺肿、甲状腺腺瘤、乳头状癌。同时进一步分析不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况；不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况。结果发现不同病理类型甲状腺结节组织WIP1 表达情况有明显差异，甲状腺癌WIP1 表达+++比例最高，三组间结果比较有差异（P＜0.05）；不同病理类型甲状腺结节组织Ang2 表达情况有明显差异，甲状腺癌Ang2 表达+++比例最高，三组间结果比较有差异（P＜0.05）。这一结果与相关文献报道基本一致[10-12]。

WIP1 可促进黏膜凋亡，一致黏膜保护和修复作用，促进肿瘤扩散。有报道证实其水平变化与乳腺癌、胃癌、结肠癌等多种肿瘤的发生发展关系密切[13]。报道WIP1 在甲状腺乳头状癌患者与甲状腺乳头状腺瘤中表达水平具有显著差异。TPX2 是微管相关蛋白，在有丝分裂尤其是纺锤体形成过程中作用显著。 TPX2 异常表达，可导致中心体异常扩增，异倍体形成，细胞恶性转化发生，促进细胞增殖，与肿瘤细胞的周期、凋亡、分化、转移、复发密切相关。

综上所述，本文认为通过测定WIP1、Ang2 蛋白表达阳性情况对判别甲状腺结节性质的有重要的价值。