刘玉杰， 高 岩， 刘洪达

(河北省唐山市第二医院 足踝外科， 河北 唐山 063000 )

0 引言

骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种退行性关节病，主要特征为关节软骨逐渐丧失，软骨基质破坏，软骨下骨硬化，导致骨赘形成[1].OA的发生是由多种因素共同作用的结果，包括衰老、超负荷应急、氧化应激等，从而改变了关节生理和生物力学环境的变化.研究证实，某些蛋白酶和凋亡因子可诱导软骨基质降解和软骨细胞凋亡，是OA发生的重要因素[2,3].年龄相关的氧化应激被认为是OA发生发展的主要原因[4,5]，H2O2是由超氧岐化酶形成的超氧化合物，可以产生活性氧(reactive oxygen species，ROS)，从而导致细胞和动物线粒体的凋亡.主要原理为H2O2改变线粒体膜，使细胞小体C进入到细胞质中[6]，参与caspase-3活化，是细胞凋亡信号通路的调节因素，最终导致细胞的凋亡.

自噬是细胞凋亡的另一种自毁过程，是细胞存活的重要途径[7].越来越多的研究证实，细胞的自噬保护功能一部分是通过负调控凋亡发挥的作用.花青素是黄酮类化合物的一个重要亚科，在花、果、种子和植物叶片中含量丰富.研究证实，花青素具有抗菌、抗氧化、抗炎和抗诱变的特性[8].本研究使用大鼠软骨细胞凋亡模型，探讨花青素对H2O2诱导的大鼠软骨细胞凋亡和自噬的影响.

1 材料与方法

1.1 动物、试剂和仪器

新生1周龄的SPF级SD大鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司；花青素、CCK8、DMSO均购自美国sigma-aldrich公司，所有抗体GADPH、Bax、Bcl-2、Beclin-1、p62均购自美国cell signaling technology(CST)公司；RNA提取试剂为Trizol和real-time PCR试剂盒，购自美国Thermo Fisher公司；反转录试剂盒，购自日本Takara公司；……