丹酚酸A激活AKT/mTOR/4EBP1通路缓解脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激
2020-05-09崔勤涛王俊华刘晓晨王学惠马海英苏国宝
崔勤涛,王俊华,刘晓晨,王学惠,马海英,苏国宝
(新乡医学院第一附属医院心血管外科,河南 新乡 453000)
多种心肌疾病中均存在心肌细胞凋亡的现象,它是导致心脏功能恶化、心室重塑、各种慢性心力衰竭的主要因素;抑制心肌细胞凋亡、减轻心脏重塑、改善心肌细胞生存环境是治疗心肌疾病的重要措施[1-3]。研究发现,心肌缺血再灌注损伤[4]、心肌梗死[5]和心力衰竭等过程中都会有心肌细胞凋亡的发生,引起细胞氧化的因素可以诱导细胞的凋亡,而抗氧化剂则可抑制氧化诱导的细胞凋亡[6]。在这些病理过程中,由于心肌活性氧(reactive oxygen species,ROS)自由基产生增加,使得其与氧化应激关系密切[7]。氧化应激是指由于活性氧过量生成或细胞内抗氧化防御系统受损,导致超氧阴离子O2-和H2O2等氧自由基及其相关代谢产物过量聚集,从而对细胞产生多种毒性作用的病理状态。研究表明,中药丹参主要提取成分丹酚酸A(salvianolic acid A,Sal A)具有显著的抗氧化和抗细胞凋亡作用,其抗氧化活性对心肌损伤具有显著的保护作用[8-9],但有关Sal A能否对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激具有保护作用尚缺乏可靠证据。本研究利用LPS诱导建立H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,探讨Sal A对LPS诱导的氧化应激性损伤H9c2心肌细胞存活和凋亡的保护作用,以及对蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/起始因子4E结合蛋白(protein kinase B/mammlain target of Rapamycin/eIF4E-binding protein 1,AKT/mTOR/4EBP 1)通路相关蛋白表达的影响,为Sal A临床治疗心肌损伤提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 试剂和仪器
Sal A(Sigma公司,美国);……
