张 恒，付 炯，何 鹏，王永权，杨 忠，周占松 (.陆军军医大学第一附属医院全军泌尿中心，重庆 400038；.陆军军医大学神经生物学教研室，重庆 400038)

慢性前列腺炎疼痛是泌尿男性生殖科的顽症，常表现为持续内脏牵涉痛，且前列腺炎症消失后疼痛相关症状仍持续存在，其发生已证实与神经机制的异常有关。脊髓小胶质细胞是中枢系统的重要免疫细胞，在神经病理性疼痛中可通过分泌炎症介质因子而致痛。疼痛领域初步研究还发现，Notch3参与胶质细胞神经病理性痛觉信息的传递，是调控痛觉传导的关键信号分子之一，但慢性前列腺炎疼痛中Notch3是否通过介导小胶质细胞活化引起持续的前列腺炎疼痛尚有待研究[1]。本研究通过建立慢性前列腺炎疼痛大鼠模型，观察L5～S2脊段Notch3信号是否介导小胶质细胞活化，并通过调节致痛炎症因子导致中枢的痛觉过敏，以进一步阐明慢性前列腺炎疼痛发生的神经机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和仪器

CFA购自Sigma公司(美国)，Notch3和IBA-1引物合成由基康生物公司完成(中国)，RT-PCR kit和ELISA kit购自上海生工(中国)，SYBR green PCR core reagent kit 购自Applied Biosystems公司(美国)，DNA Engine OPTIONTm2购自MJ research 公司(美国)。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的建立和分组 慢性前列腺炎疼痛大鼠模型参照Nackley等[2]和 Butler等[3]的方法建立，成年雄性特异性无病原体(specific pathogen free，SPF)大鼠由陆军军医大学动物实验中心提供，体质量(200±25)g。实验分为两部分：一是疼痛模型的鉴定、Notch3和小胶质细胞活化，炎症因子的检测，完全随机分为实验组和对照组(n=6)。大鼠均采用1%戊巴比妥钠腹腔注射，前列腺经下腹正中小切口(1 cm)暴露，实验组大鼠前列腺双侧叶各注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant，CFA)10 μL，对照组双侧叶注射等量生理盐水。……