何映华 何荧 周玲艳 潘伟明

摘 要：本研究以发芽4d，生长状况良好，高约4cm的菜心无菌苗为材料，初步研究了菜心幼苗不同部位材料、渗透（甘露醇）浓度、酶解时间、果胶酶、纤维素酶浓度等关键因素对原生质体游离的影响。结果表明，从菜心幼苗的幼叶组织分离原生质体效果比下胚轴好;以w=1.5%的纤维素和w=0.4%的果胶酶为酶解液，在0.8mol/L甘露醇浓度下，40～50r/min的摇床中黑暗酶解4h时，原生质体产量是最高的。

关键词：菜心;外植体;原生质游离;条件优化

中图分类号：S-3

文献标识码：A

DOI：10.19754/j.nyyjs.20200415005

收稿日期：2020-03-05

基金项目：广东省科技厅农业攻关项目

作者简介：何映华（1995-），女，本科在读。研究方向：生物技术;通讯作者潘伟明（1969-），男，硕士，研究员。研究方向：植物遗传育种。

菜心（Brassica campestris var. Parachinesis）是十字花科蕓薹属中以菜薹为产品的一种蔬菜，是华南地区栽培规模最大的特产蔬菜之一，在华南地区的蔬菜周年供应及出口创汇中起着举足轻重的作用[1]。每年4—9月份是广东省高温多雨的季节，菜心露地栽培难度大，病虫多发、产量低、品质差[2]。这大大限制了菜心产业的进一步发展，因此迫切需要选育适合华南地区条件生长、抗逆性佳的优良品种。

原生质体由于没有细胞壁，在物理、化学因素诱导下，2个互相靠近的原生质体可发生融合，可以克服远缘杂交不亲和障碍，从而获得杂种株系，服务于作物改良[3]。植物原生质体与植物细胞一样具有全能性，而且可以直接导入外源DNA、细胞器等。因此可以导入特定的基因，从而达到改良作物的品质、抗逆性等目的，是植物遗传转化不可多得的理想受体[3-5]。……