冯秀晶，易红梅，任星旭，任佳丽，葛建镕，王凤格

综 述

数字PCR技术及其在检测领域的应用

冯秀晶，易红梅，任星旭，任佳丽，葛建镕，王凤格

北京市农林科学院玉米研究中心，玉米DNA指纹及分子育种北京市重点实验室，北京 100097

随着分子生物学技术的不断发展和需求的多样化，用于核酸检测的各种PCR衍生技术应运而生。数字PCR是一种单分子水平的大规模分区扩增定量核酸检测技术。该技术以微腔室/微孔或微滴作为PCR反应器，无需校准物和绘制标准曲线即可实现对样品初始浓度的绝对定量，具有高灵敏度、高特异性和高精确度的特点。本文详细介绍了数字PCR的技术发展史、作用原理以及仪器平台类型，系统阐述了数字PCR在转基因检测、疾病诊断、环境及食品监管等方面的应用概况，并对该技术的应用前景进行了展望，以期对未来数字PCR的开发利用提供参考。

数字PCR；单分子；绝对定量

自1983年Kary Mullis等发明PCR这一革命性技术以来，这种核酸分析方法以其简便、直观、经济、快捷等特性在检测领域一直占据主导地位[1]。随着分子生物学技术的不断发展和需求的多样化，基于普通PCR的各种衍生技术应运而生。PCR技术已不仅仅局限于对靶基因进行体外无限扩增，而是由定性转向了更为精确的定量。1992年，Higuchi等[2]最早提出了实时荧光定量PCR (real time quan­titative polymerase chain reaction, qPCR)的设想。qPCR通过在PCR反应体系中加入荧光基团，实时监测整个PCR进程中荧光信号的积累，最后利用标准曲线对未知模板进行定量分析。此后，qPCR被广泛应用于临床诊断、生物育种、食品安全检测和法医鉴定等领域。……