钮 静， 权文强， 李 冬

（1.上海市宝山区中西医结合医院检验科，上海 210900；2.同济大学附属同济医院检验科，上海 200065）

靶向治疗是目前非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）主要的治疗手段[1]。有研究发现，表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）在NSCLC靶向治疗中具有重要作用，其酪氨酸激酶编码区基因突变是靶向药物发挥作用的必要前提条件[2-4]。因此，进行EGFR基因突变检测在肺癌的靶向治疗中显得尤为重要。但目前用于EGFR基因突变检测的方法操作复杂、检测周期长，且实验对象多为组织标本，阻碍了EGFR基因突变检测在临床的应用。因此，临床需要建立更加简单、快速、准确、经济的检测方法。

环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术是近年来兴起的快速核酸扩增技术，主要利用2对或3对特异性引物和具有链置换活性的Bst DNA聚合酶，在恒温条件下连续高效扩增，具有很高的特异性和敏感性。LAMP技术操作简单，在普通恒温设备中就能完成扩增，可肉眼直接判读结果，非常适合核酸的快速检测[5-6]。目前，LAMP技术已被广泛用于临床疾病的诊断、病原微生物的定性检测、基因芯片开发等领域。本研究拟建立一种采用LAMP技术快速检测NSCLC患者EGFR基因21号外显子L858R位点突变的即时检测（point-of-care testing，POCT）新方法。

1 材料和方法

1.1 研究对象

收集2017年上海市胸科医院收治的11例NSCLC患者血浆标本，所有患者均排除肺部炎症性疾病、合并其他原发肿瘤，聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测结果均为EGFR L858R突变阳性。另收集2017年上海市宝山区中西医结合医院9名体检健康者血浆标本；含有L858R突变的细胞株H1975和野生型细胞株A549购自中国科学院上海生命科学研究院。……