李文桂，陈雅棠

重庆医科大学附属第一医院 传染病寄生虫病研究所，重庆 400016

铜绿假单胞菌（Psendomonas aeruginosa）是一种院内感染的常见致病菌，用抗生素治疗易产生耐药性，需要探索其他治疗方法。许多研究表明脂多糖、多糖、藻酸盐、鞭毛或菌毛均可作为疫苗使用，但有许多缺陷，故需寻找其他抗原[1]。铜绿假单胞菌外毒素A（P.aeruginosaexotoxin A，PEA）编码基因长约1.9 kb，编码的蛋白相对分子质量（Mr）为66 000，由613个氨基酸残基组成。研究表明，PEA含有252个氨基酸残基的结构域Ⅰa、128个残基的结构域Ⅱ、39个残基的结构域Ⅰb以及194个残基的结构域Ⅲ。PEA具有下述作用：呈现ADP-核糖基转移酶的活性，既有较强的免疫原性，又有较好的佐剂效应，可作为黏膜佐剂使用；催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）水解为烟酰胺（N）和腺苷二磷酸核糖（ADPR），ADPR结合EF-2后使其失活，导致肽链无法延长，从而阻止蛋白的合成[2]；抑制淋巴细胞的转化，抑制外周血单核细胞（PBMC）产生TNF-α、IL-6、IL-10和IL-8等细胞因子[3-5]；诱导中性粒细胞、肥大细胞和鼠胚胎成纤维细胞发生凋亡，从而逃避免疫细胞的杀伤作用[6-8]；刺激小鼠肺泡的Ⅱ型上皮细胞产生H2O2及自噬相关蛋白LC3，引起细胞自噬[9]。大量研究表明铜绿假单胞菌的温度敏感株D/1/8和E/9/9、甲醛灭活的疫苗株SBI-N以及PEA类毒素可诱导小鼠产生较好的保护力[10-12]，表明PEA抗原具有作为疫苗的潜力。在此，我们将对PEA蛋白分子、融合蛋白、耦合蛋白以及核酸疫苗等的研制现状进行综述。

1 PEA蛋白分子

Gilleland等[13]将20 μg PEA蛋白加铝佐剂肌肉注射SD大鼠，初次接种后2、4周加强2次，初次接种后6周血清IgG升高，此时气管内注射5×104CFU的PA01株进行攻击，攻击后1周免疫组的肺组织病理变化显著减轻，计数存活率表明免疫组和对照组分别为72.2%（13/18）和0（0/18）。……