蒋洪昆，郭 伟，吕桂桦

(广西壮族自治区柳州市人民医院检验科，广西柳州 545001)

肌红蛋白(MYO)属于血红素蛋白家族，是肌肉内的储氧蛋白，仅仅存在于心肌细胞和氧化的骨骼肌纤维内并能与氧气可逆的结合。它能够很好地在肌肉内储存氧气并能在组织缺氧时将其释放出来；也能够在肌肉活动增加时调节细胞内的氧浓度。据研究表明，肌红蛋白是一个灵敏、可靠的早期诊断急性冠状动脉综合征(ACS)和检测溶栓疗效的指标[1]。同时，肌红蛋白的检测对急性心肌梗死、心力衰竭的诊断及严重程度的判断，急性一氧化碳中毒、糖尿病酮症等的诊断方面均有重要的临床意义[2-6]。颗粒增强型免疫透射比浊法的检测原理是使用抗人肌红蛋白抗体包被的乳胶颗粒和样品中的肌红蛋白进行抗原-抗体反应，反应完成后，固定时间检测吸光度来确定肌红蛋白的浓度。本文参照美国临床和实验室标准协会(CLSI)相关文件对颗粒增强型免疫透射比浊法检测肌红蛋白进行性能评价。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年6-9月柳州市人民医院住院患者和门诊患者及健康体检者，所有标本均为常规检查的剩余标本，不涉及任何与患者隐私相关的医疗信息。

1.2仪器与试剂 Olympus AU2700型全自动生化分析仪，颗粒增强型免疫透射比浊法检测肌红蛋白试剂采用上海德赛诊断系统的试剂盒(批号14432)。

1.3方法

1.3.1精密度评价 参照CLSI颁布的EP15-A文件《用户对精密度和准确度性能的核实试验——批准指南》，取选取两种浓度水平的样本各一份，浓度水平应与厂家精密度评价时所用样本接近或与医学决定水平接近，每天分析1个批次，共进行5天，每份标本每天重复测定3次。计算出批内变异系数(CV)、批间CV各项指标，最后对照厂家声明进行验证。

1.3.2准确度评价 统计分析室间质评结果,对参加的卫生部室间质评的10个不同批号的样本测定结果进行分析，以卫生部临床检验中心组织的室间质量评价的靶值为真值，本仪器的相对偏倚按下列公式计算 偏倚=(测定值-靶值)/靶值×100%，10个批号质控物的实验室检测结果均在允许偏移范围，则正确度验证通过。

1.3.3参考区间验证 选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，对结果进行统计并对仪器说明书提供的参考区间进行验证，若20份标本的检测结果均在仪器说明书提供的参考区间内或仅有2个标本超出，则验证通过。否则，进行参考区间确立实验。

1.4统计学处理 采用SPSS13.0进行统计学分析。

2 结 果

2.1精密度评价结果 2个水平的样本每天分析1个批次，共进行5 d，每份标本每天重复测定3次。计算出批内CV、批间CV各项指标，批内CV值和批间CV值及实验室变异系数均小于厂商说明1.2%，说明该方法有较高的重复性，精密度验证通过。水平1和水平2的精密度结果见表1。

2.2准确度评价结果 表2显示的是参加卫生部临床检验中心全国心肌标志物室间质量评价的结果。

表1 精密度评价结果

表2 准确度评价

2.3参考区间验证 结果显示在选取的20例健康参考个体中，MYO的测量值均在厂商提供的参考区间内(<70 μg/L),说明厂家提供的生物参考区间适合于本实验室使用。

3 讨 论

肌红蛋白是一种广泛存在于心肌和骨骼肌中的蛋白质，具有储存和运输氧的功能[7]。当机体的横纹肌受损伤，心肌和骨骼肌中的肌红蛋白便释放入血液中，检测血清中的肌红蛋白水平对于心肌损伤的疾病和多发伤患者的临床诊断、治疗及预后判断具有重要意义。BHAYANA等[8]研究了急性心肌梗死(AMI)患者血清中肌红蛋白的变化情况，研究发现发生AMI后，肌红蛋白可于胸痛发作后2～3 h在血液中达到病理水平，早于肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)。国内研究者发现多发伤患者的血清肌红蛋白浓度均有升高，然后呈逐渐下降趋势[5]，可见检测血清/血浆中的肌红蛋白在急性心肌梗死等疾病临床诊断、治疗及预后判断中有非常重要的作用[9]肾功能不全患者不仅具有早期监测心血管事件的意义，而且可以作为肾功能的监测指标之一[10]。

目前临床上检测血清中肌红蛋白的方法有胶体金免疫层析法[11]、光激化学发光法[12]和免疫透射比浊法[13]等。胶体金免疫层析法是利用肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金，另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线，兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线，建立的半定量金免疫层析方法，虽然可以快速得到结果，但是结果为半定量，不利于临床的鉴别诊断；光激化学发光法是使用针对不同表位的2株单克隆抗体，一株包被发光颗粒，另一株进行生物素化，与包被有链霉亲和素的感光微粒共同构成检测试剂来测定肌红蛋白水平的方法，其优点是敏感度高，但检测成本比较高，不利于节约患者开支；本研究所关注的颗粒增强型免疫透射比浊法是新一代免疫测定技术，实验原理是使用抗人肌红蛋白抗体包被的乳胶颗粒和样品中的肌红蛋白进行抗原-抗体反应，反应完成后，固定时间检测吸光度来确定肌红蛋白的浓度。它大大提高了免疫比浊技术的敏感性、特异性，具有快速、准确、重复性好、操作简单、试剂价格低廉等优点。特别是它不需要特殊的仪器，在普通生化分析仪上即可使用，极大地扩展了生化仪的使用范围，明显降低了检测成本，有利于急诊中的使用。本研究对颗粒增强型免疫透射比浊法检测肌红蛋白精密度、准确度、参考范围进行性能评价，精密度评价选择了50 μg/L和400 μg/L 2个浓度按CLSI评价方案进行精密度评价，结果显示批内变异系数为0.66%和0.78%，批间变异系数为0.50%和0.43%，均小于厂商声明的1.2%的变异系数。准确度按照CLSI EP15-A2文件进行，采用卫生部室间质评的10个不同批号的样本测定结果进行分析，结果显示所有的测定值均在允许范围内，准确度验证通过。本实验按照CLSI C28-A2文件推荐的方法进行参考范围的验证，选取了20份体检合格的健康人标本，检测结果显示所有结果均在厂商提供的参考区间内，符合文件要求，说明厂家提供的生物参考区间适合于本实验室使用。综上所述，颗粒增强型免疫透射比浊法检测肌红蛋白的分析性能与厂商提供的性能参数基本一致，均符合临床要求。