邢慧，杨珍妮，胡小翠，刘丹

胞浆多聚腺苷序列结合蛋白1 (cytoplasmic polyadenylation element binding protein 1，CPEB 1)与位于胞浆内mRNA 3′非翻译区的多聚腺苷序列结合，参与多聚腺苷酸化并调控多种蛋白的翻译活化和抑制[1-3]。2006年发现鼠胚胎成纤维细胞缺失CPEB1即发生永生化，Burn等人证实了CPEB敲低后会出现转化细胞的特征，如长端粒保留，线粒体数量减少，呼吸减少以及糖酵解率增加；此外，CPEB下调导致p53表达降低约50%，p53 mRNA的polyA尾缩短且翻译效率下降[4]。尽管CPEB1的抑癌作用在多个组织及动物模型中有所研究，但目前为止，尚无充分、完整的数据阐述结直肠癌发生发展过程中CPEB1的作用。本研究采用实时定量PCR的方法检测CPEB1 mRNA的表达情况，探讨其与结直肠癌临床病理特征以及预后的关系，获得CPEB1表达的初步数据，以期为CPEB1作为结直肠癌的潜在治疗靶点的研究提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究得到哈尔滨医科大学伦理委员会批准,收集2005至2008年哈尔滨医科大学第二附属医院接受外科手术的221例结直肠癌患者的癌组织及30例癌旁正常组织。排除术前新辅助放化疗、复发性结直肠癌或其他已知恶性肿瘤者。收集纳入患者的一般资料，肿瘤部位、大小、病理及临床分析，并进行术后随访，评估是否出现复发及转移。

1.2 方法

1.2.1 RNA分离和定量实时PCR 采用Trizol(TIANGEN，Beijing，China)一步法提取癌组织和癌旁正常组织(距肿瘤10 cm以上的上皮组织)总RNA。使用ImProm-Ⅱ TM逆转录系统(Promega)合成cDNA，应用荧光定量PCR检测CPEB1 mRNA。 扩增应用SYBRH mRNA(TaKaRa)试剂盒，GAPDH mRNA作为对照。 CPEB1上游和下游引物序列(5′-3′)分别为：GGAAGAAGAAGCAGGAAGGAT和GCATCCTGCTTGTAA-CTGTT。以GAPDH为内对照，计算各组CPEB1 mRNA的表达水平。……