刘春燕　姜宏兵　牛书敏　董清清　张新　邓朝晖

[摘要]目的 探討新疆生产建设兵团（简称兵团）第十二师6189例女性宫颈高危型人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况。方法 收集2018年12月1日～2019年2月14日兵团第十二师进行健康体检的6189例女性的宫颈分泌物，分别对其进行HPV基因分型检测，并结合年龄、HPV亚型以及混合感染情况，分析兵团第十二师女性HPV感染的分布特征。结果 在6189例样本中，HPV阳性861例，感染率为13.9%，其中单一感染648例（75.3%），多重感染213例（24.7%）。各年龄组HPV感染率为：35～<40岁组14.1%，40～<45岁组12.7%，45～<50岁组13.4%，50～<55岁组13.1%，55～<60岁组15.8%，≥60岁组17.8%。≥55岁组与35～<55岁组的HPV感染率比较，差异有统计学意义（χ2=8.541，P<0.05）。感染率排在前5位的HPV亚型分别是52型（18.1%）、16型（12.8%）、53型（9.0%）、58型（8.5%）和51型（7.9%）。HPV 52型和16型是单一感染和多重感染的主要感染亚型，其感染率在≥60岁组人群中最高。结论 兵团第十二师≥55岁女性是HPV感染的高风险人群，HPV 52型和16型为HPV主要感染亚型，对高危人群进行HPV筛查将为宫颈癌的防治提供依据。

[关键词]人乳头瘤病毒;感染率;亚型;年龄分布

[中图分类号] R737.33     [文献标识码] A     [文章编号] 1674-4721（2019）9（b）-0167-06

Analysis of high-risk human papilloma virus infection among 6189 women in a region of the crops

LIU Chun-yan   JIANG Hong-bing   NIU Shu-min   DONG Qing-qing   ZHANG Xin   DENG Zhao-hui

Department of Clinical Laboratory， Hospital of Xinjiang Production and Construction Corps， the Second Affiliated Hospital of Shihezi University Medical College， Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumqi   830002， China

[Abstract] Objective To investigate 6189 cases of cervical high-risk human papilloma virus （HPV） infection in 12th division of Xinjiang Production and Construction Corps （referred to as corps）. Methods A total of 6189 cervical secretions from healthy women over 35 years old in 12th division of the crops were collected from 1 December 2018 to 14 February 2019. HPV genotyping were performed， and the subtype distribution in different ages， mixed infection were analyzed. Results In 6189 samples， 861 cases were HPV positive， the infection rate was 13.9%， of which 648 cases （75.3%） were single infection and 213 cases （24.7%） were multiple infection. HPV infection rates in all age groups were， 14.1% in the 35-<40 years old group， 12.7% in the 40-<45 years old group， 13.4% in the 45-<50 years old group， 13.1% in the 50-<55 years old group， 15.8% in the 55-<60 years old group， 17.8% in the ≥60 years old group， and the difference between the ≥55 years old group and the 35-<55 years old group was statistically significant （χ2=8.541， P<0.05）. The HPV subtypes with the highest infection rate were type 52 （18.1%）， type 16 （12.8%）， type 53 （9.0%）， type 58 （8.5%） and type 51 （7.9%） respectively. HPV type 52 and 16 were the main subtypes of single infection and multiple infection， with the highest infection rate in the ≥60 age group. Conclusions Women ≥55 years old from the 12th division of the corps are high-risk groups for HPV infection. HPV types 52 and 16 are the main subtypes of HPV infection. HPV screening for high-risk groups will provide basis for the prevention and treatment of cervical cancer.

[Key words] Human papilloma virus; Infection rate; Subtype; Age distribution

宫颈癌发病率仅次于乳腺癌，是位居女性发病率第二位的恶性肿瘤[1]，高危型人乳头瘤病毒（HPV）持续感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变发生的主要因素[2-3]。目前已分离出200多种HPV的基因型，其中约40多种与生殖道病变相关[4]，不同型别的HPV，其致病力与宫颈癌的病理分型存在较大的差异[5]，因此，HPV的分型检测已经成为筛查和预防宫颈癌的关键问题之一。另外，不同地区的HPV感染情况及基因类型的分布存在差异[6]，通过分析当地区域内女性宫颈HPV的感染和基因类型情况，对筛查和防治宫颈癌具有重要的指导意义。本研究通过收集新疆生产建设兵团（简称兵团）第十二师进行健康体检的6189例35岁以上女性的宫颈分泌物，并对其进行HPV基因分型检测，围绕HPV的感染和分布情况展开调查研究，旨在为本地区女性HPV感染的筛查和防治提供依据，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

收集2018年12月1日～2019年2月14日兵团第十二师进行健康体检的6189例女性的宫颈分泌物进行HPV的分型检测，其中调查对象年龄为35～98岁，平均（48.57±7.0）岁。纳入标准：①年龄≥35岁者;②有性行为史，但在样本采集前的48 h内没有性行为者;③未孕且非行经期者;④样本采集前的3 d内未进行阴道冲洗或使用避孕药膏等阴道内用药者。排除标准：①患有细菌性、霉菌性、滴虫性阴道炎者;②有子宫切除史者。本研究经兵团医院医学伦理委员会批准，调查对象均自愿参加本研究并签署知情同意书。

1.2仪器与试剂

SLAN-96P全自动医用分析系统（上海宏石医疗科技有限公司）;高危型人乳头瘤病毒核酸（分型）检测试剂盒[聚合酶链式反应（PCR）-荧光探针法]（湖南圣湘生物科技有限公司）。所检测的高危型HPV亚型共有15种型别，分别为：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型。

1.3樣本采集与处理

样本采集前用棉拭子拭去宫颈口的分泌物，将宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷，使其顺时针旋转3～4圈，取得脱落细胞，慢慢取出宫颈刷，将其放入装有细胞保存液的无菌样本管中，充分漂洗，并在检测前充分震荡混匀。

1.4 HPV的基因型检测

将“1.3”项所采集的样本，用高危型HPV核酸（分型）检测试剂盒中的核酸释放剂进行快速裂解，使样本中的HPV DNA释放，将其分成8或4个反应管，利用HPV 15种型别的特异性引物及荧光探针，应用PCR结合Taqman技术，分别进行HPV的15种型别的特异性DNA片段进行检测。

1.5观察指标及评价标准

通过对样本的HPV基因进行分型检测，观察HPV感染的类型、阳性率、多重感染及在人群中的分布情况。其中HPV感染阳性以宫颈分泌物HPV检测的CT值（CT值=-3.601 lgN+45.19）为判断标准，其中，CT值指的是当反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所需经历的循环数，与HPV拷贝数（N）的对数（lgN）成负相关。HPV阳性的判断标准为：①CT值≤39为阳性;②无CT值或CT值>39为阴性。若检查结果出现1个阳性基因型，则为单一感染;检查结果出现2个阳性基因型，则为双重感染;检查结果出现3个阳性基因型，则为三重感染;检查结果出现≥4个阳性基因型，则为其他多重感染。阳性率=HPV感染阳性例数/总例数×100%。

1.6统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率或构成比表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 HPV的感染情况

在6189例样本中，HPV阳性共861例，阳性率为13.9%（861/6189），其中单一感染648例，多重感染213例（双重感染163例、三重感染42例、其他多重感染8例）。单一感染与多重感染之比为3.04∶1.00。在多重感染中，以双重感染最为多见，占多重感染的76.5%（163/213）。

2.2不同年龄组调查对象HPV感染情况的比较

将调查对象按年龄进行分组，分别为35～<40岁组、40～<45岁组、45～<50岁组、50～<55岁组、55～<60岁组、≥60岁组。其中，55～<60岁组的HPV感染阳性率高于40～<45岁组，差异有统计学意义（P<0.05），55～<60岁组的HPV感染阳性率高于50～<55岁组，差异有统计学意义（P<0.05）。≥60岁组的HPV感染阳性率高于40～<45岁组，差异有统计学意义（P<0.05），≥60岁组的HPV感染阳性率高于45～<50岁组，差异有统计学意义（P<0.05），≥60岁组的HPV感染阳性率高于50～<55岁组，差异有统计学意义（P<0.05）。其余各组间HPV感染阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

其中≥55岁组（将55～<60组与≥60岁组调查对象合并）的HPV感染阳性率高于35～<55岁组，差异有统计学意义（χ2=8.634，P<0.05），提示≥55岁女性是HPV感染的高发人群。

2.3 HPV感染亚型的分布情况

检测861例HPV阳性样本中高危型HPV的15种亚型。在861例HPV阳性样本中，共检出HPV 1134株，感染率排在前5位的亚型分别为52型（18.1%）、16型（12.8%）、53型（9.0%）、58型（8.5%）和51型（7.9%）。18型的感染率仅为3.5%（表2）。

2.4 HPV多重感染亚型的分布情况

在861例HPV阳性样本中共检出HPV 1134株，其中单一感染的HPV 648例648株，双重感染的HPV 163例326株，三重感染的HPV 42例126株，其他多重感染的HPV 8例34株。单一感染的感染率排在前5位的亚型分别为52、16、53、51和68型;双重感染的感染率排在前5位的亚型分别为52、58、16、39和68型;三重感染的感染率排在前5位的亚型分别为52、16、51、58和53型;其他多重感染的感染率排在前5位的亚型分别为52、53、66、16和68型（表3）。

2.5不同年龄组调查对象HPV单一感染和多重感染的分布情况

本研究不同年龄组的HPV阳性样本中，以单一感染为主，也存在与其他亚型混合感染（表4）;其中55～<60岁女性是单一感染、双重感染和其他多重感染的高发人群，≥60岁女性是单一感染、双重感染、三重感染和其他多重感染的高发人群（图1）。

2.6不同年齡组调查对象HPV 52型和16型的分布情况

本研究共检出HPV 52型205例（表5），其中单一感染137例，与其他亚型混合感染68例;HPV 16型145例（表5），其中单一感染95例，与其他亚型混合感染50例。35～<40岁组和≥60岁组女性是HPV 52型感染的高危人群，≥60岁女性是HPV 16型感染的高发人群（图2）。

3讨论

宫颈癌是严重威胁女性健康的主要疾病之一，我国每年新发病例约占世界宫颈癌新发病例的28.0%，居于我国女性生殖道恶性肿瘤的首位[7]。有研究证实宫颈癌的发病与HPV感染有直接关系[8]，国际癌症研究中心（International Agency for Research on Cancer，IARC）专题讨论会（1995年）认为HPV感染是宫颈癌发生的主要因素[9]。有研究[4]表明，有40多种HPV的基因型与宫颈的感染和病变相关。其中，高危型HPV亚型包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68型等，其持续感染与宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的发生相关[10]。我国宫颈癌高发地区的HPV感染率为10%～20%，宫颈癌低发地区的HPV感染率为5%～10%[11]。本研究分析了兵团第十二师6189例≥35岁女性进行健康体检的宫颈分泌物数据，其中，HPV的感染率为13.9%，与姚立丽等[12]的报道结果一致。研究结果提示，HPV感染在不同的年龄组存在两个高峰[13-14]，年轻女性免疫系统不完善，性生活频繁，易受到HPV的感染，是HPV感染的第一个高峰;第二个感染高峰常出现在女性绝经以后，体内激素水平波动较大，导致机体免疫力下降，宿主对病毒感染的清除或抑制作用减弱，致使HPV出现持续感染。本研究的调查对象为35岁以上女性，未观察年轻女性的HPV感染情况。分析不同年龄组感染率，35～<40、40～<45、45～<50和50～<55岁组的感染率基本接近，约为13.1%;≥60岁组感染率高达20.8%。但是，本研究中≥60岁入组的调查对象仅有428例，不足以代表高年龄段体检人群的HPV感染率，因此，本研究同时比较了≥55岁组（将55～<60组与≥60岁组调查对象合并）与35～<55岁组人群的HPV感染率，差异有统计学意义（P<0.05）。结果提示，≥55岁年龄组女性的HPV感染率上升至20.6%左右，出现感染率的第2个高峰。

不同地区的HPV基因型分布存在差异，调查显示，HPV 16/18型是世界范围内也是欧美国家主要感染的基因亚型，亚洲地区HPV 52/58型为常见感染的基因亚型[15]。我国不同地域HPV基因型分布差异也较大，除了HPV 16/18型外，HPV 52/58型的感染比例也较高[16]。本研究结果提示，感染率排在前5位的基因亚型分别为52型（23.8%）、16型（16.8%）、53型（12.0%）、58型（11.1%）和51型（10.5%），基本与王丽娜等[6]的报道结果一致，研究对象为妇产科出现临床症状就诊的女性，多以HPV 16/18型感染为主[14]。本研究中HPV 52型的感染率占据首位，可能与纳入人群为健康体检女性相关[17]。鲁静等[18]研究发现，新疆南部维吾尔族女性感染HPV的主要基因型为HPV 16/18型，而本研究HPV 18型感染率仅为4.6%，可能与南北疆人群种族差异、居住环境、经济状况、认识不足、教育欠缺以及筛查技术手段等因素相关。不同的HPV基因型之间基本上没有交叉保护性抗体，容易造成不同HPV基因型的多重感染。与姜丹等[19]的研究结果接近，本研究HPV感染以单一感染为主，单一感染与多重感染的比例约为3∶1，其中单一感染和多重感染都以HPV 52型为主。HPV 16型在单一感染中占14.7%，随着感染HPV亚型的增加，HPV 16型的比例略有下降，可能与HPV 16型单独感染具有较强的致病性相关[14]，但其仍然是多重感染中主要的感染亚型之一。分析单一感染和多重感染在不同年龄组的感染率发现，≥55岁女性的感染率均比其他年龄组升高，更易发生HPV单一或多重感染，这可能与中老年人机体免疫力下降相关[14]。

本研究中，HPV单一感染或多重感染均以HPV 52/16型为主，HPV 52型在≥60岁组女性中的感染率最高，其次是35～<40岁组人群;HPV 16型在≥60岁组人群中的感染率最高。本研究结果提示，兵团第十二师女性宫颈HPV感染的分布特征及年龄特点为：≥55岁女性是HPV感染的高风险人群，这些高危型HPV感染造成的宫颈上皮内瘤变是可逆转的癌前期病变，对宫颈上皮内瘤变的早期干预可起到积极作用，可有效地预防宫颈癌的发生。本课题组将采用液基薄层细胞学技术对HPV阳性样本进行细胞学诊断，分析HPV 52/16型在不同程度的宫颈上皮内瘤变的分布特征，为兵团第十二师宫颈癌的二级预防提供必要的流行病学数据，对该地区宫颈癌疫苗的接种工作具有一定的参考意义。

[参考文献]

[1]王丽萍.高危型HPV DNA病毒负荷量与宫颈病变的研究[J].中国医师杂志，2011，13（2）：1682-1683.

[2]张宁，刘笑梅.宫颈HPV持续性感染的临床研究进展[J].国际生物医学工程杂志，2018，41（4）：348-353.

[3]Kreimer AR，Schiffman M，Herrero R，et al.Long-term risk of recurrent cervical human papillomavirus infection and precancer and cancer following excisional treatment[J].Int J Cancer，2012，131（1）：211-214.

[4]Heardi I，Tondeur L，Arowas L，et al.Human papillomavirus types distribution in organised cervical cancer screening in France[J].PLoS One，2013，8（11）：e79372.

[5]Cremoux P，Rochefordière A，Savignoni A，et al.Different outcome of invasive cervical cancer associated with high-riskversus intermediate-risk HPV genotype[J].Int J Cancer，2009，124（4）：778-782.

[6]王丽娜，王鹏雁，王远志.新疆北疆部分地区HPV的分子流行病学调查及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立[D].新疆：石河子大学，2016：91.

[7]Parkin DM，Bary F，Ferlay J，et al.Estimating the world cancer burden：Globocan 2001[J].Int J Cancer，2001，94（2）：153-156.

[8]董云虹，苏颖.HPV检测在宫颈病变筛查中的应用[J].中国医药指南，2012，10（7）：138-139.

[9]李华，高国兰.HPV与宫颈癌的研究进展[J].实用癌症杂志，2007，22（4）：420-422.

[10]Serrano B，De Sanjose S，Tous S，et al.Human papillomavirus genotype attribution for HPVs 6，11，16，18，31，33，45，52 and 58 in female anogenital lesions[J].Eur J Cancer，2015， 51（13）：1732-1741.

[11]趙方辉，戎寿德，乔友林，等.山西省襄垣县女性HPV感染与宫颈癌关系的研究[J].中华流行病学杂志，2001，22（5）：375-378.

[12]姚立丽，袁敏，袁建林，等.乌鲁木齐地区女性HPV感染状况及宫颈病变发生情况分析[J].中国妇幼保健，2018， 10（3）：23-25.

[13]Holl K，Nowakowski AM，Powell N，et al.Human papilloma virus prevalence and typedistribution in cervical glandular neoplasias：results from a European multinational epidemiological study[J].Int J Cancer，2015，137（12）：2858-2868.

[14]黄路遥，许燕燕，侯彦强，等.上海市松江区HPV感染情况分析[J].检验医学，2017，32（8）：695-699.

[15]De Sanjose S，Quint WG，Alemany L，et al.Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer：a retrospective cross-sectional worldwide study[J].Lancet Oncol，2010，11（11）：1048-1056.

[16]范成娇，李静，鲁爱枝.HPV 52/58感染与女性宫内病变发生风险的相关性研究[J].中国妇幼保健，2015，30（4）：841-843.

[17]张俊英，杨叔哲，贺苇军，等.成都地区女性宫颈人乳头状瘤病毒HPV 52/58感染状况调查[J].检验医学与临床，2018，4（15）：1143-1146.

[18]鲁静，玛依努尔·尼牙孜，李丽，等.新疆南部维吾尔族女性感染人乳头状瘤病毒（HPV）基因型与宫颈病变的相关性研究[J].新疆医学，2009，39（1）：3-6.

[19]姜丹，叶劲东，张晓平，等.深圳市万名流动女性HPV感染现状分析[J].中国公共卫生管理，2012，28（6）：796-798.

（收稿日期：2019-03-18   本文编辑：孟庆卿）