李艳伟 宋兴辉 王佳佳 刘丽 黄莹莹 郭春

（浙江大学医学院生物化学与分子生物学平台，杭州 310058）

细胞凋亡（Apoptosis），又称程序性细胞死亡（Pragrammed cell death），是指在一定的生理和病理情况下，机体为了维持内环境稳定并由基因控制的有序的细胞自主性死亡形式［1-3］，与肿瘤的发生、发展与转移有密切关系，是研究药物抗肿瘤作用机制的重要方向［4］。细胞凋亡检测对于基础研究和临床诊断具有重要意义，目前用于体外细胞凋亡检测的方法很多，流式细胞分析法可对单个细胞或其他生物微粒进行快速定量分析，是定量检测细胞凋亡的重要方法之一，其中Annexin V/PI 法是目前较为流行的检测细胞凋亡的方法，具有分析细胞量大、灵敏度高、方便快捷等优点［5-7］。

高通量实时细胞功能分析系统（xCELLigence-RTCA系统）是基于检测电子传感器阻抗变化以反映细胞生理状态的新型细胞分析系统，测定的电阻抗转化为细胞指数（Cell index）即反映了细胞群体各种生理变化包括细胞生长、形态变化、死亡等一系列生理状态［8-9］。可在近似生理环境下实现高通量、动态、无标记检测肿瘤细胞增殖、凋亡等多项生理学功能［10］。

本研究将xCELLigence-RTCA的实时无标记技术和流式细胞术相结合，选择非小肺癌细胞A549作为靶细胞，以能促进A549细胞凋亡DDP作为靶分子，采用传统的流式细胞分析技术作为平行对照，初步确定了这种实时无标记技术联合流式细胞术的筛选体系用于肿瘤细胞凋亡筛选可行性和可靠性。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 人非小细胞肺癌细胞株A549（中国科学院上海细胞库ATCC：Cat No：CCL-185TM）。……