快速免疫组化技术检测在前列腺穿刺组织冰冻切片诊断中的应用价值
2019-10-24河南省肿瘤医院郑州大学附属肿瘤医院450003王大鹏
河南省肿瘤医院 郑州大学附属肿瘤医院(450003)王大鹏
1 资料与方法
1.1 临床资料 研究对象为我院从2017年2月~2018年4月医院所选取的60例前列腺穿刺标本,经病理诊断为前列腺癌20例,良性前列腺增生40例。年龄为50~84岁,平均年龄为(67±11.2)岁。取所有病例组织冰冻切片,连续做6μm,取每例4张空白的冰冻切片。冰余组织经石蜡包埋连续4μm切片。
1.2 方法 经快速免疫组化染色检测留取的空白冰冻切片,冰余组织石蜡切片经常规免疫组化染色检测。以PBS代替一抗为阴性,已知阳性对照组为阳性对照组组。常规石蜡切片免疫组化染色方法操作步骤:切片放在67℃的烘烤箱中,并进行2h的烘片,脱蜡至水,经pH值为7.4的PBS至少冲洗3次,每次冲洗时间3分钟;取适量pH6.0柠檬酸盐缓冲液,加到微波盒中,加热至沸腾,之后脱蜡水化后组织,取组织切片放在耐高温的塑料架上,放入沸腾缓冲液中,微波炉中档温度加热10分钟,取出后自然冷却,并用蒸馏水进行冲洗。
快速免疫组化染色法的操作步骤:冰冻切片放于冷甲醇4℃环境下固定1分钟,在自然环境下晾干15s,经PBS液体冲洗1次,每次冲洗10s;加即用型一抗放于37℃环境下,孵育10分钟,经PBS冲洗3次,每次冲洗时间20s;加即用型的试验试剂,放于37℃环境下,孵育5分钟,经PBS进行3次冲洗,每次冲洗时间20s。
1.3 判断标准 评价P40、34βE12、p504S阳性表达标准,并对比两种检测方法的阳性率。P40阳性表达在基底细胞胞核;34βE12阳性表达基底细胞胞质,p504S阳性表达腺体上皮细胞胞质[1]。
1.4 统计学分析 数据处理工具为SPSS20.0。不同组间计数资料分别用x2检验,有统计学意义P<0.05表示。……
