郑娟娟

【中图分类号】R197      【文献标识码】A      【文章编号】1672-3783（2019）12-0284-01

PCR技术并不是一个不常见的技术，它作为一种分子生物技术，是对人体内天然的DNA复制过程进行模拟，实现DNA分子的体外扩增，一般在对两段已知序列间的DNA区段进行扩增时应用。在需要扩增的片段两侧与互补该片段两侧的寡核苷酸引物，通过高温变性和低温退火，外加中温延伸三过程，进行若干循环之后，扩增DNA片段二的n次方倍。

其中，高温变性是指将要扩增的DNA放到高温下去加热，保持高温在94摄氏度左右，这样一来就会断掉该双链DNA之间的氢键，变成两条单链。而低温退火指的是把所用溶液降到50到60摄氏度，根据碱基配对原则把引物和要扩增的DNA互补结合起来，中温延伸就是在以上基础上，把温度升高到72摄氏度，将单链的DAN作为模板，在耐热DNA聚合酶的作用下，利用引物引导，按照5'-3方向将混合物里面四种脱氧核苷三磷酸加以利用，复制成为互补的DNA。

现在，该技术也在食品微生物检测中应用广泛，那么它究竟是怎样应用的呢，用在哪里呢？请大家跟随笔者的脚步，一起来了解一下。

应用一、肠出血性大肠杆菌的检测与鉴定

我们知道，大肠杆菌产出的毒素是具有一致性的特征的，所以在以前的技术中，我们使用的单一的PCR技术方式虽然可以检测大肠杆菌，但是很难对血性大肠杆菌做一个比较精确的鉴定和检测，所以我们现在的检测都是利用多重PCR技术，应用紧密素基因、贺毒素基因、溶血素基因、脂多糖基因和stx2等目的基因。……