游金坤，严 明，庄阳秋，吴素蕊，崔佳丽

（1.中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所，云南 昆明 650221；2.云南省药物研究所，云南 昆明 650111）

黑脉羊肚菌（Morchella angusticeps） 又称小尖羊肚菌，是野生名贵食（药） 用菌[1]，其营养丰富，富含蛋白质、氨基酸、多种矿物质及丰富的脂肪酸[2]。现代研究发现，羊肚菌有降血脂、调节免疫、抗疲劳、抗辐射、抗肿瘤等作用[3-7]。目前，关于羊肚菌的研究多集中于多糖、无机元素及菌丝培养[8-10]。针对黑脉羊肚菌抗氧化活性成分的研究报道较少。前期研究结果表明，黑脉羊肚菌具有良好的抗氧化活性，主要成分为水溶性小分子极性化合物，以水提取部位含量最为丰富[11]，但对于该化合物的定性分析尚未见报道。

本试验中，通过HPLC-DPPH在线检测法，筛选黑脉羊肚菌不同提取物的抗氧化活性成分，并应用UPLC-Q Exactive超高效液相色谱高分辨质谱联用仪对筛选所获得抗氧化成分进行定性分析，以期建立直观、快速、准确并适用于复杂天然产物中抗氧化活性成分快速筛选与定性的方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

黑脉羊肚菌由中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所提供；固相萃取小柱，Waters Oasis HLB，美国；DPPH，优级纯，美国Sigma公司；甲醇，色谱纯，美国Merck公司；甲醇，质谱纯，美国Thermo Fisher Scientific公司；甲酸，色谱纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；三氯甲烷、无水乙醇，分析纯，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；超纯水，自制。

1.2 仪器与设备

高效液相色谱仪，Agilent 1200 Series，美国 Agilent公司；Chemstation B.03.02色谱工作站；中压恒流泵，同田生物科技有限公司；反应圈：PEEK管（长 5.000 m，内径 0.250 mm）；……