Alda-1通过激活线粒体乙醛脱氢酶2改善大鼠肺缺血再灌注损伤
2019-10-21张裕坚林婷婷夏芳芳董娇娇金周晟刘乐
张裕坚,林婷婷,夏芳芳,董娇娇,金周晟,刘乐
(温州医科大学附属第一医院 麻醉科,浙江 温州 325015)
肺缺血再灌注损伤(lung ischemia-reperfusion injury,LIRI)广泛存在于各种临床事件中,如肺栓塞、肺移植、体外循环术等,期间形成活性氧自由基、炎症级联反应、钙超载、细胞凋亡等一系列病生理过程,严重影响患者的预后[1]。线粒体乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)是机体内醛类物质代谢的关键酶,可将有毒性的醛类物质转化为无毒性的羧酸类物质起到解毒作用。近年来研究发现激活ALDH2 可减轻心[2-5]、脑[6]、肝[7-8]、肾[9]、肠[10]等脏器的缺血再灌注损伤。本研究在现有基础上,给予ALDH2 激动剂Alda-1对LIRI进行预处理,检测肺病理学、醛类物质和ALDH2,从而探求Alda-1减轻LIRI的保护作用。
1 材料和方法
1.1 材料健康成年SPF级雄性SD大鼠,体质量300~350 g,由温州医科大学实验动物中心提供,动物生产许可证号:SCXK(浙)2015-0001。丙二醛(malondialdehyde,MDA)测定试剂盒(硫代巴比妥酸比色法,南京建成生物工程研究所);大鼠4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)ELISA试剂盒(上海研谨生物科技有限公司);兔抗β-actin多克隆抗体(美国Abcam公司,货号:ab8227),兔抗ALDH2单克隆抗体(美国Abcam公司,货号:ab108306),ALDH2 活性比色法检测试剂盒(美国Biovision公司);BCA蛋白浓度测定试剂盒(美国Thermo公司)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组及构建大鼠LIRI模型:参考钱小英等[11]的方法复制大鼠在体LIRI模型,采用随机数字表法将大鼠进行分组,分为假手术组(Sham组)、肺缺血再灌注组(I/R组)和Alda-1预处理组(Alda-1组),每组8只。Sham组开胸后仅显露左肺门,但不进行结扎;I/R组开胸后阻断左肺门30 min,再开放恢复供血和通气120 min;Alda-1组于缺血前1 h腹腔注射Alda-1(6 mg/kg),其余同I/R组。实验结束取大鼠动脉血用于测MDA及4-HNE;……
