APP下载

枸橼酸坦度螺酮对高血压大鼠BP、ET-1、NO水平及昼夜节律的影响

2019-09-25

中西医结合心脑血管病杂志 2019年16期
关键词:枸橼酸节律血浆

近年来人们生活节奏不断加快,精神压力越来越大,而精神压力引起血压、心率、心排血量、脏器血流量等循环要素发生变化,对高血压发病、经过、预后产生极大影响。因此,对高血压病人进行精神护理的重要性日益升高,如何合理使用抗焦虑抑郁药,对高血压治疗非常重要。坦度螺酮是在抗焦虑作用基础上兼具抗抑郁作用的5羟色胺激动剂,属于高血压的治疗药物。血管内皮系统在调节血压与维持血压昼夜节律方面具有重要作用,其中一氧化氮(NO)和内皮素1(ET-1)是具有代表性的一对血管活性物质[1-2]。高血压病可损伤机体内皮细胞,导致NO、ET-1合成释放失衡[3]。本研究探讨枸橼酸坦度螺酮不同昼夜时间给药对高血压大鼠血压(BP)、血浆NO和ET-1的影响。

1 材料与方法

1.1 实验仪器 戴尔实验用计算机,MS2000生物信号记录分析系统(广东龙飞达技术有限公司)、721分光光度计。

1.2 实验试剂 枸橼酸坦度螺酮片(大日本住友制药株式会社茨木工厂生产,生产批号021116),硝基-L-精氨酸甲酯(NG -nitro-L-arginine-methlester,L-NAME,美国Sigma公司生产),ET-1和NO试剂盒(北京东亚生物技术研究所)。

1.3 实验动物 同龄健康雄性SPF级大鼠90只,体重150~175 g(北京实验动物中心提供)。

1.4 实验方法 大鼠在实验动物房后明/暗各12 h下适应2周,将L-NAME溶于水中灌胃,每次10 mL,连续灌胃5周后,参照Sigmon方法[4]复制高血压模型,将大鼠分为高血压对照组和坦度螺酮组,各45只。将各组大鼠按照随机分配原则,分为峰值前给药组(血压峰值前2 h给药)、中值前给药组(血压中值前2 h给药)、谷值前给药组(血压谷值前2 h给药),每组15只。高血压对照组大鼠给予饮用水灌胃,坦度螺酮组大鼠给予枸橼酸坦度螺酮(研末后溶于饮用水)灌胃给药,连续饲养4周。

1.5 观察指标

1.5.1 血压测定 给药前和给药后分别测定各组大鼠尾动脉血压,采用尾动脉介入法:2.4%水合氯醛(240 mg/kg)麻醉,大鼠背部向上固定,消毒尾部,直至尾动脉显现后,将仪器穿刺针缓慢插入尾动脉,将有肝素生理盐水的导管经传感器并与计算机连接,造模成功后将大鼠固定于特质笼子,进食和饮水正常进行,大鼠清醒后MS2000多媒体生物信号记录分析仪器连续监测24 h,采用自身对照法观察血压变化。

1.5.2 血浆ET和NO检测 血压测定完成后,10%水

合氯醛(0.33 mL/100 g)腹腔麻醉,开胸暴露心脏,取心室内血液,测定ET-1、NO。取血时间08:00~09:00,1.0 mL血液中加入7.5%乙二胺四乙酸(EDTA)二钠15 μL和抑肽酶20 μL[5],以3 000 r/min离心3 min,分离血浆,置于-20 ℃冰箱保存,严格按照试剂盒检测ET-1和NO。

2 结 果

2.1 正常大鼠尾动脉压昼夜节律 采用MS2000多媒体生物信号记录分析仪器连续监测24 h后,应用余弦软件分析血压数据,得出正常大鼠血压昼夜节律图,其中中值(均值)M=89.324±2.570,振幅A=5.8±1.4,峰值位相Ф=5.204±0.334。

2.2 两组大鼠不同时间血压比较 治疗后,坦度螺酮组3个时间血压均降低,以峰值前血压降低最明显,与高血压对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

组别只数 峰值前2 h 给药前给药后 中值前2 h 给药前给药后 谷值前2 h 给药前给药后高血压对照组15132.4±6.1132.3±6.2133.4±6.3133.3±6.2131.2±6.0131.1±6.1坦度螺酮组15133.0±6.2112.4±4.3132.6±6.2122.0±3.4132.0±6.1122.4±3.9t值-0.6233.2010.5272.417-0.4272.214P>0.05<0.05>0.05<0.05>0.05<0.05

注:1 mmHg=0.133 kPa

2.3 两组大鼠不同时间血浆NO和ET水平比较 坦度螺酮组大鼠血浆ET-1水平低于高血压对照组,NO水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表2。

组别只数NO(μmol/L)ET-1(pg/mL)高血压对照组4525.3±1.7179.8±8.9坦度螺酮组4536.1±2.8160.3±9.01)t值-3.0212.174P<0.05<0.05

2.4 坦度螺酮组不同时间血浆NO和ET-1水平比较 不同时间给药后,血浆NO水平均高于高血压模型期(P<0.05),峰值前2 h给药后NO水平升高最明显(P<0.05);不同时间给药后,血浆ET-1水平低于高血压模型期,峰值前2 h和中值前2 h给药后ET-1显著降低(P<0.05)。详见表3。

时间NO(μmol/L)ET-1(pg/mL)高血压模型期25.1±1.3179.8±8.7峰值前2 h39.6±0.71)2)163.1±10.21)2)中值前2 h34.7±0.81)161.0±7.91)2)谷值前2 h34.3±0.71)166.2±10.31)

与高血压模型期比较,1)P<0.05;与谷值前2 h比较;2)P<0.05

3 讨 论

人体各个系统生理活动均具有明显的节律现象,依照节律周期分为3种类型:①节律周期接近24 h为近日节律;②节律周期明显小于24 h为超日节律;③节律周期长于24 h属于亚日节律。人体常见的生理活动为近日节律,心血管系统多数生理与病理现象均属此类[6]。心脑血管疾病的发生具有明显昼夜节律,心肌梗死、心脏猝死、室性心律失常及脑卒中等均于早晨高发而夜间发病率最低。相关研究发现,NO、ET-1等水平或活性均呈现典型的昼夜节律。人体血压的昼

夜节律性较大程度取决于NO、ET-1时间生物学特征。有研究表明,血压昼夜节律紊乱是导致靶器官损害的重要因素,非杓型高血压病人靶器官损害程度严重,主要由于机体心肌肥厚,脑血管硬化严重。血压昼夜节律消失是独立于血压之外的心脑血管病预测因素[7]。高血压的临床治疗中,如何恢复或维持血压的正常昼夜节律,是目前临床研究的热点。

本研究以高血压大鼠作为实验对象,长期应用NO合成酶抑制剂L-NAME复制典型高血压大鼠模型,并对每只大鼠进行尾动脉置管,并进行24 h动态血压监测,余弦软件分析血压节律情况,从而标记高血压模型大鼠高血压期血压峰值、中值及谷值时间,以确定实验给药时间[8]。给药枸橼酸坦度螺酮2 h后,坦度螺酮血浆浓度达到峰值,因此,分组时以坦度螺酮药效最佳时间前2 h灌胃给药,使血药浓度峰值分别处于以上3个时间。本研究结果表明,大鼠经枸橼酸坦度螺酮灌胃后4周,与高血压对照组大鼠比较,血压均明显降低,表明枸橼酸坦度螺酮可拮抗由L-NAME引起的高血压;以峰值前2 h给药后大鼠血压下降最明显,结果显示最大血药浓度出现在血压处于峰值时,给予枸橼酸坦度螺酮治疗降压效果显著。

NO为近年来发现的一种新型信息传递体,作为机体主要的一类舒血管活性物质,通过激活水溶性鸟苷酸环化酶,升高平滑肌环磷酸鸟苷(cGMP)浓度,达到舒张血管目的[9]。ET-1是体内已知的最强缩血管物质,主要由日本学者Yanagisawade等于1988年经猪主动脉内皮细胞分离出的一种多肽[1]。本研究采用枸橼酸坦度螺酮不同时间给药后,坦度螺酮组与高血压对照组比较,血浆NO水平升高,以峰值前给药升高程度最明显,这主要与峰值前给予坦度螺酮后血压降低最明显,峰值前和中值前给药后血浆ET-1低于高血压对照组。结果表明,降压过程中NO可能起着重要作用,但具体作用机制需进一步验证。

高血压疾病的治疗,不仅需考虑药物的代谢动力学,同时治疗过程需根据病人血压情况选择合理时间给药,从而为高血压治疗提供新方向[10]。选择高血压药物或其他药物治疗时,根据病人血压节律情况结合治疗药物的药理性质,选择合适的给药时间,反复研究进而找到稳定的降压时间,最大程度降低病人血压。本研究结果证明,枸橼酸坦度螺酮对高血压大鼠具有降压作用,并可改善其内皮功能。

猜你喜欢

枸橼酸节律血浆
补肾活血方联合枸橼酸氯米芬在排卵障碍性不孕症中的应用
糖尿病早期认知功能障碍与血浆P-tau217相关性研究进展
GmELF3s调控大豆开花时间和生物钟节律的功能分析
枸橼酸抗凝在重症患者连续血液净化中的应用进展
不同血流速在出血患者枸橼酸钠抗凝血液透析中的临床研究
血浆置换加双重血浆分子吸附对自身免疫性肝炎合并肝衰竭的细胞因子的影响
空间里的时间:微重力等环境下的生物节律研究
局部枸橼酸抗凝在肝衰竭患者连续性肾脏替代治疗中的应用
你真的了解献血浆是怎么回事吗?
脑卒中后中枢性疼痛相关血浆氨基酸筛选