李美慧

摘要：高效液相色谱检测方法具有很强的分辨率、灵敏度，且能够同时测定几种性质类似的食品成分。本文在阐述高效液相色谱法的基础上，具体分析高效液相色谱检测法在食品维生素C成分检测中的应用。

关键词：高效液相色谱;维生素C;检测应用

高效液相色谱检测法是在上世纪六十年代发展起来的一种同新型分析、分离技术，是在以往液相色谱法基础上引入的气相色谱法理论，之后在高效、高灵敏度检测器的基础上发展而成。在使用的过程中，高效液相色谱法具有很强的灵敏度、分辨率，且色谱柱在使用的过程中能够被反复利用，因为被人们广泛应用在生物化学、食品分析、医药研究、无机分析等领域。

一、材料和方法

仪器和试剂的选择。实验检测仪器选择Agilentll00高效液相色谱仪，辅助配合应用二极管阵列检测仪器。实验试剂包含甲醇、辛烷磺酸钠和应用甲醇辛烷磺酸钠配置成0. 1%水溶液;三氟乙酸;67抗环血酸。利用仪器设备准確称量lOmg的抗坏血酸标准品，并按照每升O.lmol的比例溶解盐酸，之后用高纯度水将纯水定容在100毫升左右[1]。

色谱条件的确定。实验操作色谱柱型号为250mmx4.6mmx5μm;流动相是甲醇和0.1%比例的辛烷磺酸钠溶液;检测波长为230mm;样本的流动速度是每分钟1ml;样品的进样量是1OμL。在确定好色谱条件之后以浓度为基本横坐标、峰面积数值为纵坐标绘制工作曲线，之后通过回归计算得到回归方程Y=496.5XC - 149.1，回归系数是0.9996。

样品检测和结果计算。在实验中，对于液体样品不需要进行额外的处理，在应用滤膜过滤之后按照相应的色谱条件进行直接进样处理。固体样品则需要按照相关规定称取一定数量的样品，在样品容器中加入蒸馏水，一直到样品达到25mL，超声波提取5分钟。根据样品的峰面积计算出样品中维生素C的含量。

二、结果和讨论

第一，色谱条件的选择。首先，检测波长的选择。将配置完成的维生素C溶液放置在二极管阵列进行波长扫描，发现维生素C溶液在239nm位置上的时候会被最大限度吸收，为此将239nm作为实验检测波长。维生素C的紫外吸收图谱和峰纯度图谱如图1所示。其次，流动相选择。考虑到抗坏血酸在酸性环境中比较稳定，因而流动相的酸碱值确定为酸性，具体数值在3-4.5之间[2]。同时，应用辛烷磺酸钠作为离子检测试剂。第二，精密度试验。通过精密度试验操作发现，RSD的数值在0.56% -1.18%。第三，回收率试验。应用加标回收的方式对试验的精确度进行评价，之后选取其中的五份样本进行色谱测定，测定结果如表1所示。第四，方法的线性范围和检出限。在色谱条件下制定标准的工作曲线，具体如图2所示，根据工作曲线了解到实验的线性范围为0.3μg/ML - 1.6μg/ML。第五，实验测定结果和荧光法测定结果比较如表2所示。

从以上的实践操作情况来看，高效液相色谱法不仅能够测定食品或者保健品中的维生素成分，而且还能够在检测分析的过程中采取定量和定性结合的方式同时分离和测定几种维生素，从而帮助人们更好地了解食品及保健品中的成分，确保食品安全。但是从实际应用情况来看，对于不同食品和保健品，维生素C的样品预处理和色谱分析条件不同，为此，在具体操作中需要相关人员结合试验条件的不同来选择适合的色谱分析方法，从而提升样品测定成效。

参考文献

[1]鲁杰，杨大进，王竹天.固相萃取一高效液相色谱法测定保健食品中维生素B12的研究[J].中国食品卫生杂志，2004，16（4）：324-328.

[2]王爱月，张向兵，李发生.高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究[J].中国卫生检验杂志，2006.16（10）：1175-1176.