毕铮铮　吴立新　李晓美　梁启航　杨冠男　王异华

摘要在粗脂肪水平分别为10%、14%和18%的3种试验饲料中添加0.09%的胆汁酸，投喂初始体重为（23.12+0.10）g的大菱鲆49d，研究不同脂肪水平下胆汁酸对大菱鲆生长和肌肉脂肪酸组成的影响。结果表明，随着饲料脂肪水平的升高，终末体重、增重率、特定生长率和蛋白质效率均显著升高，饲料系数显著降低（P<0.05）;饲料脂肪水平对大菱鲆肌肉饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸以及多不饱和脂肪酸的含量无显著影响（P>0.05）;3组试验鱼肌肉的脂肪酸组成均显示多为不饱和脂肪酸>饱和脂肪酸>单不饱和脂肪酸的趋势，但无显著差异（P>0.05），n-3/n-6比值呈现先上升后下降的趋势。综上所述，胆汁酸水平为0.09%、饲料脂肪水平为18%时，更能促进大菱鲆生长发育，但不会改变其肌肉脂肪酸组成。

关键词 大菱鲆;胆汁酸;生长;脂肪酸

中图分类号 S963

文献标识码 A

文章编号 1007-5739（2019）07-0190-02

胆汁酸是胆汁的重要组成成分，具有较强的表面活性，能降低油水两相间的表面张力及降低甘油三酯水平，促进脂类乳化，能不同程度地改变鱼类对脂溶性维生素的吸收利用和不同组织中脂肪酸占组织油脂的质量比;扩大脂肪和脂肪酶的接触面积，从而加速脂类消化吸收，增强鱼类的免疫机能14。大菱鲆（Scophthalmus maximus）又名多宝鱼，属鲆科（Bothidae）菱鲆属（Scophthalmus），易适应集约化养殖，生长迅速、肉味鲜美、经济价值高，其工厂化养殖规模居全球之首，是我国北方重要的海水养殖鱼类。有关胆汁酸在水产动物配合饲料中的研究已有报道，但在大菱鲆配合饲料中的研究较少。孙建珍等5研究在不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆生长和脂肪代谢的影响，其胆汁酸添加量为厂家推荐量的1.5%;黄炳山等0进一步研究得出胆汁酸最适添加量为0.09%。本试验在其基础上以大菱鲆为研究对象，在0.09%胆汁酸水平下设计3种脂肪水平不同的配合饲料，研究其对大菱鲆生长性能、肌肉脂肪酸的影响，以期为大菱鲆配合饲料中胆t酸的应用提供理论参考。

1材料与方法

1.1试验材料

试验饲料中主要蛋白源为鱼粉和豆粕，以鱼油作为主要的脂肪源，通过调整配合饲料中鱼油和羧甲基千维素的含量，配制3种试验饲料，粗脂肪含量分别为10%、14%、18%，依次命名为B1o、B14和B18组，每组设3个重复组。在3种饲料中分别添加0.09%的胆？十酸。配合饲料的原料经粉碎处理之后，使用60目网筛进行筛选，依据饲料配方，逐级扩大混匀后用制粒机进行挤压制粒，制成粒径为2mm的颗粒状饲料，自然风千至饲料中水分含量降至10%左右，而后置于-20C冰箱中保存备用。试验饲料配方和基本营养组成详见表1。

胆十酸为山东龙昌动物保健品有限公司提供，以玉米淀粉为载体，纯度为20%。

1.2养殖试验设计及管理

试验用鱼购自大连天正实业有限公司。以普通商品饲料驯养2周。试验开始前，将鱼饥饿24h，选取体质健康、规格均匀、体重（23.12+0.10）g的试验鱼108尾。试验共设3组，分别为Bro（10%）、B14（14%）和B1s（18%）组，每组设3个重复，共9个水族箱（60cmx45cmx40cm，实际水量90L），每个水族箱放人12尾鱼，饲养49d。

试验期间，以砂滤后的海水为水源，日换水1次，换水量为1/3～1/2，水温控制在14.0～19.0C之间，溶解氧>6.0mg/L，氨氮<0.1mg/L，pH值为8.0～8.1;光照采用日光灯控制，周期为12L12D。每日饱食投喂2次（7：30和17：30），投喂30min后收集残饵。

1.3样品采集及分析

养殖试验结束后，将试验鱼再次禁食24h，记录每槽鱼数量并计算成活率，对每槽鱼称总重并计算增重率。从每槽中随机抽取8尾试验鱼，测量体质量和体长，计算肥满度;在冰盘上解剖分离内脏团、肝胰脏称重，计算肝体比、脏体比;取背部肌肉，用于脂肪酸分析。所有样品均需置于-80C保存備用。

饲料中常规营养成分的测定，需要参照AOAC（1995）方法。粗蛋白质含量采用凯氏定氮半微量法进行测定;粗脂肪含量测定采用索氏抽提法，并以石油醚为抽提液;粗灰分含量通过在马福炉中550C灼烧8h测定。

1.3.1生长性能测定公式。具体如下：

增重率/%=100x（Wt-W0）/W0;

特定生长率/（%/d）=100x（lnWt-lnW0）/d;

饲料系数=FI/（Wt-W0）;

蛋白质效率/%=l00x（Wt-W0）（FIxCp）;

摄食率/%=l00xF/[（Wt+W0）/2/d];

肝体比/%=l00xWH/WB;

脏体比/%=100xWV/WB;

肥满度/（g/cm3）=l00xWB/LB';

存活率/%=l00xNs/Ne。

式中，Wt为末体重（g）;W0为初体重（g）;FI为摄食饲料千重量（g）;d为饲养天数;Cp为饲料中粗蛋白含量（%）;WH为肝胰脏质量（g）;WI为肠道质量（g）;WV为内脏团质量（g）;WB为体质量（g）;LB为体长（em）;Ns为存活尾数，Ne为试验鱼尾数。

1.3.2肌肉脂肪酸含量的测定。参照氯仿一甲醇法和氢氧化钾一甲醇酯化法对分析样品中总脂肪进行提取，将方法略做改进，样品经皂化一甲酯化后，用日本岛津GC-2010高效气相色谱仪分析。色谱条件：FFAP抗氧化交联石英毛细管色谱柱，30mx0.25mmx0.3μm;载气为高纯氮，空气流速400m[/min，氢气流速为40mL/min;气化室温度稳定在260C;分流比100：1;氢离子火焰检测器（FID），温度260C;采用程序升温法，起始温度160C，保持5min后，以2C/min进行升温，当升温至230C时，维持10min;进样量为1μL。根据标准样品色谱峰的保留时间和文献值来综合鉴定脂肪酸，计算脂肪酸的相对百分含量采用峰面积归一化法。

1.4统计分析

试验数据以平均值+标准差表示。用软件SPSS21.0软件对数据进行单因素方差分析;若存在显著差异时则用Dun一can's法进行处理间多重比较，显著性水平为P<0.05。

2结果与分析

2.1不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆生长性能的影响

由表2可知，不同脂肪水平下添加胆汁酸的Bro、B14Bi83个组相比，随着脂肪水平的升高，终末体重、增重率、特定生长率和蛋白质效率均显著升高，饲料系数则显著降低（P<0.05）。肥满度和肝体比随饲料脂肪水平的增加而增加，当饲料脂肪水平达14%时继续增加饲料脂肪水平，大菱鲆肥满度和肝体比则不再有显著变化（P>0.05）。在试验期间，个别组大菱鲆有死亡：现象，但无显著差异（P>0.05）。

2.2不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆脂肪酸组成的影响

如表3所示，在SFA中，C14：0、C15：0、C16：0和C18：0各组间差异不显著，在18%的脂肪水平下C17：0显著升高，而C20：0却显著下降（P<0.05）。在MUFA中，C18：1n-9和C22：1各组间无显著差异，B18组的C16：1n-7和C18：1n-7显著高于B10，而C20：1则显著低于B1o（P<0.05）。在PUFA中，C18：3n-3.C18：4n-3.C20：3n-3.C22：5n-3和DHA各组间差异不显著，在18%脂肪水平下C22：4n-6和C20：5n-3显著升高而C18：2n-6、C20：2n-6则显著下降（P<0.05），C22：5n-6和C20：4n-6在B14显著升高。不同脂肪水平大菱鲆肌肉的脂肪酸组成显示PUFA>SFA>MUFA，n-3/n-6比值呈现先上升后下降的趋势;SFA、MUFAPUFA的含量均无显著差异（P>0.05）。

3讨论与结论

3.1不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆生长的影响

在饲料中添加0.09%胆汁酸，且饲料中脂肪水平低于18%时，随饲料脂肪水平的升高大菱鲆的增重率、特定生长率、蛋白质效率均显著升高，饲料系数显著下降，对大菱鲆有明显的促进生长作用。其原因可能是胆汁酸能够促进脂肪乳化，扩大脂肪与脂肪酶的接触面积，加速脂肪的消化吸收，提高饲料利用率，降低饵料系数，从而促进鱼类生长。随着脂肪水平的增加蛋白质效率提高，可以减少蛋白质作为能量被消耗，让更多蛋白质作用于鱼类机体构建上，同样达到促进鱼类生长的目的。孙建珍研究表明，在不同脂肪水平饲料中添加1.5%胆汁酸对大菱鲆生长研究发现，试验鱼的增重率.特定生长率和蛋白质效率随着脂肪水平呈现先升高后下降的趋势，16%脂肪组达到最大值，饲料系数呈现相反趋势，与本试验结果不同，这可能是由于试验用鱼大小不同造成的试验结果差异;杨俊江8研究表明，脂肪水平为15%和18%时，10.02g斜带石斑幼鱼的终末体重高于102.8g斜带石斑中鱼，在相似的脂肪水平下本试验中大菱鲆的终末体重与其试验结果相似。本试验中胆头十酸添加量为0.09%，是以黄炳山阿对大菱鲆饲料中添加胆十酸的研究中所得最适添加量为依据，与孙建珍的研究在饲料中添加1.5%胆汁酸具有促进大菱鲆幼鱼生长的效果基本相同，说明高脂饲料中低水平胆十酸可以达到相同的促生长效果。

3.2不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆肌肉脂肪酸的影响

不同脂肪水平下添加胆汁酸对大菱鲆肌肉脂肪酸有显著影响。孙建珍等研究发现，在胆汁酸1.5%的条件下，饲料中添加油脂改变了SFA、MUFA.PUFAn-3PUFA、n-6PUFA的百分含量。本研究发现，胆汁酸添加量为0.09%，3个不同脂肪水平下对大菱鲆肌肉中SFA、MUFAPUFA的含量无显著影响。本试验与王恒9的研究结果一致，但与孙建珍试验结果不同，这可能与试验鱼规格、饲料脂肪水平、脂肪源、试验条件等因素有关。

3.3结论

在粗脂肪含量为10%、14%和18%的不同脂肪水平下添加胆汁酸0.09%，研究发现，随着脂肪水平的升高，增重率特定生长率、蛋白质效率均显著升高，饲料系数则下降;在添加0.09%胆汁酸的前提下，随着饲料中鱼油水平的提高，大菱鲆肌肉肌肉饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸的含量基本不随鱼油水平的增加而变化。根据本试验结果，胆汁酸水平为0.09%、饲料脂肪水平為18%时，更能促进大菱鲆生长。

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