袁雪， 邱槿怡， 王思怡， 豆荣昆， 向飞丹州， 杨飘， 茆灿泉

(1. 西南交通大学 生命科学与工程学院， 成都 610031; 2. 云南民族医药研究所有限公司， 昆明 650228)

肝癌是一类严重危害人类生命的重大疾病。FoxM1的过量表达与肝癌的侵袭、转移、耐药、预后不良密切相关，其被认为是癌症的致命伤和可作为肝癌预后和治疗的潜在生物标志物[1-3]。中药和民族医药是中华民族优秀文化的传承瑰宝，可望在包括肝癌在内的多种重大疾病的预防和治疗中发挥重要的作用。“天然植物抗菌液”(Natural plant antimicrobial solution，PAMs)是云南民族医药研究所股份有限公司从红花、紫草、刺天茄、芸香草等多种民间和传统中草药中提取制备的一种复方产品，2015年其升级产品“紫芸解毒止痛酊”获批云南省医院制剂(Z20150009)。前期研究发现，PAMs对白血病、银屑病、炎症等多种疾病具有广泛的生物学活性与作用[4]，但其对肝癌细胞的作用、尤其是体内活性和分子作用机制尚不清楚。本文通过体内外实验研究，并结合FoxM1的表达调控和凋亡作用分析，初步揭示PAMs对HepG2细胞的作用效果和分子机制，旨在为PAMs的进一步开发利用提供前期工作基础。

1 材料和方法

1.1 PAMs的制备

PAMs由云南民族医药研究所有限公司生产和提供，产品酒精含量为50%。

1.2 细胞培养

HepG2细胞培养在含10% FBS(Hyclone)和2%抗生素(100 U/mL青霉素和100 mg/mL链霉素，Hyclone)的DMEM培养基(Gibco)中，并置于37 ℃和5% CO2的湿润细胞培养箱中培养。

1.3 细胞活力测定

3×103个/孔HepG2细胞铺于96孔板(Corning)中，培养24 h后，不同浓度的PAMs进行处理。24 h或48 h后，加入10 μL CCK-8并孵育1.5 h。酶标仪(Bio-Tek)450 nm波长检测样品吸光度值。相对抑制率(%)=(实验组平均吸光度值/对照组平均吸光度值)×100%。……