郭井泉 王俊峰

【摘要】 目的：探究血管内皮生长因子介导自噬相关通路在椎间盘退变大鼠中的作用。方法：选取SPF级3月龄大鼠120只，体质量（300±50）g，制作腰椎不稳定模型并切除卵巢会加速椎间盘的退变，分为4组：A组为假手术组（control）;B组为切除卵巢的模型组（model）;C组为切除卵巢并注射雌激素组（estrogen）;D组为切除卵巢并注射自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（3-MA）。使用HE染色和免疫组织化学染色检测大鼠椎间盘退变程度及自噬程度，使用Westen Bolt检测大鼠血管内皮生长因子VEGF-A、p-mTOR、自噬相关蛋白Beclin-1和LC3的表达量、凋亡信号通路相关蛋白Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量，使用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：相比control组，model组和3-MA组大鼠椎间盘退变显著加重，自噬程度显著降低，VEGF-A、p-mTOR、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达顯著升高，Beclin-1和LC3蛋白表达显著降低，且差异有统计学意义（P<0.01）;相比model组，estrogen组大鼠鼠椎间盘退变显著减轻，自噬程度显著升高，VEGF-A、p-mTOR、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著降低，Beclin-1和LC3蛋白表达显著升高，且差异有统计学意义（P<0.01）。结论：大鼠椎间盘退变后会促进血管生成因子表达增加，使得自噬水平显著降低，其机制可能是退变过程中出现的新生血管化激活了mTOR信号通路并促进细胞凋亡通路，抑制了椎间盘髓核细胞自噬过程。

【关键词】 椎间盘退变; 血管内皮生长因子; 自噬; 凋亡

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.15.072 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）15-0-04

随着我国人口老龄化和生活、工作方式的转变，退变性腰椎疾病的发生率近年来不断增高[1]。退变性腰椎疾病不仅会使得患者腰椎侧凸畸形，同时也会严重影响患者的生活质量。Zhang等[2]研究表明，脊柱退行性疾病的发病机制中，椎间盘退变（intervertebral disc degeneration，IDD）发挥重要的始动和核心作用。自噬（autophagy）是在正常生理条件下或存在应激反应，如生长因子耗竭、氧化应激、营养剥夺[3]。一定程度的自噬可以在细胞受到外界影响时起到保护作用，但过度自噬也可能导致细胞死亡，这种死亡被称为Ⅱ型程序性细胞死亡。血管内皮生长细胞因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是血管形成的中心调控者，这种细胞因子在生理及病理性血管生成中发挥着重要的作用[4]。……