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1种快速检测小麦籽粒中脱落酸和生长素的方法

2019-08-13李超李诚李春艳

江苏农业科学 2019年2期
关键词:高效液相色谱

李超 李诚 李春艳

摘要:拟建立小麦籽粒中脱落酸、生长素的快速提取方法和高效液相色谱(HPLC)法检测2种激素的试验体系。经试验对比,采用异丙醇、水、浓盐酸体积比=2 ∶ 1 ∶ 0.002的混合溶液作为提取液,以二氯甲烷作为萃取溶剂,简化了提取过程,提高了提取效率。HPLC的分离采用ZORBAXSB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)反相色谱柱,柱温为 26 ℃,检测器波长为262 nm,流动相为甲醇、乙酸水溶液(乙酸的体积分数为0.2%),其中甲醇、乙酸体积比=38 ∶ 62,流速为1 mL/min。结果表明,小麦籽粒中2种激素的分离效果较好,加标回收率达95.8%~96.6%,标准偏差在1.14%~1.59%之间。由此可见,该提取方法和检测体系的建立为快速提取和检测小麦籽粒中的脱落酸和生长素提供了可靠的方法。

关键词:小麦;脱落酸;生长素;高效液相色谱

中图分类号: S512.101  文献标志码: A  文章编号:1002-1302(2019)02-0194-03

植物激素在植物生长发育及应对生物和非生物胁迫的反应中起着关键的作用[1-3]。小麦是我国重要的粮食作物,内源性激素对小麦灌浆期籽粒的发育影响很大,会直接影响小麦的产量和品质[4-5]。因此,研究小麦内源激素的变化,对于通过人工干预措施调控小麦生产具有重要的实践价值。现有的检测植物内源性激素的方法有生物鉴定法[6]、生物传感器法、酶联免疫法、光谱和色谱法,其中色谱法包括气相色谱法(GC)或与质谱联用(GC-MS)法、高效液相色谱法(HPLC)或与质谱联用(HPLC-MS)法、超高效液相色谱法等。生物鉴定法、光谱法和生物传感器法因其专一性和局限性限制在近年来鲜有报道。间接酶联免疫法因其使用方便、成本低、速度快而使其使用较为普遍,但灵敏度低,不能较好地满足实际检测需要[7]。……

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