陈 敏，段泰豪，李勤琴，邓少丽，陈 鸣,唱 凯

(陆军军医大学第三附属医院检验科，重庆 400042)

高脂血症是指由于机体脂质代谢或运转异常导致血浆内一种或多种脂质高于正常值的一类疾病，常见的有高三酰甘油血症和高胆固醇血症，主要危害为诱发和加重动脉粥样硬化及并发各类动脉栓塞性疾病，包括冠心病、心肌梗死、脑栓塞、肾动脉栓赛等。冠状动脉粥样硬化性心血管病是一种具有高患病率、高致残率和高病死率特性的疾病，是严重威胁人类健康的主要杀手之一[1-2]。他汀类药物是目前最能有效降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的降脂药物，成为了世界上临床使用最广泛的降脂药。但使用他汀类药物同样可能出现不良反应，常见的有肝功能异常、肌病及横纹肌溶解、消化道反应等，最严重的不良反应当属横纹肌溶解。大量应用他汀类药物后人们发现不同个体间在降脂效果及不良反应方面有相当大的差异，研究表明载脂蛋白E(ApoE)和SLCO1B1基因是影响他汀类药物药效动力学和药代动力学的两个重要因素[3-4]。本研究通过测定重庆地区高脂血症人群ApoE和SLCO1B1基因型及分析两种基因的分布和相互关系来解析本地区高脂血症患者使用他汀类药物的合理性，为重庆地区临床使用他汀类药物进行调脂疗法的个体化治疗方案提供一定的依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年7-12月来中国人民解放军陆军军医大学第三附属医院血脂异常患者497例，包括空腹血清总胆固醇(TC)>5.2 mmol/L；三酰甘油(TG)>1.7 mmol/L； LDL-C>3.4 mmol/L；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)<1.0 mmol/L，男252例，女245例，平均年龄(66±11)岁。

1.2 仪器与试剂 人血基因组DNA提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司、人类SLCO1B1和ApoE基因检测试剂盒购自武汉友芝友医疗科技有限公司及BIO-RAD CFX-96实时荧光定量PCR仪。

1.3 方法 提取DNA及位点检测，按照说明书提取外周静脉血基因组DNA，采用PCR-荧光探针法测定ApoE基因ApoE2(526C>T)、ApoE4(388T>C)位点和SLCO1B1基因SLCO1B1*1b(388A>G)、SLCO1B1*5(521T>C)位点多态性。

1.4 统计学处理 ApoE和SLCO1B1基因型和等位基因频率均应用频率计数法计算。按ApoE基因型分为疗效良好组(E2/E2,E2/E3)、疗效正常组(E2/E4,E3/E3)、疗效不良组(E3/E4,E4/E4)，并计算3组基因型频率；再将SLCO1B1按横纹肌溶解症和肌病风险分为正常风险组(*1a/*1a，*1a/*1b,*1b/*1b)、中度风险组(*1a/*5，*1a/*15，*1b/*15)、高度风险组(*5/*5，*5/*15，*15/*15)，计算出3个疗效组间SLCO1B1基因型频率和等位基因频率并进行比较及分析。

2 结 果

2.1 ApoE和SLCO1B1基因型检测结果 使用激发波长450～490 nm(FAM)和激发波长515～535 nm(VIC)通道采集多态性ApoE和SLCO1B1基因扩增荧光信号，使用激发波长560～590 nm(ROX)通道采集内标基因扩增的荧光信号，ApoE和SLCO1B1的各种基因型判读见表1、2。

表1 ApoE基因型结果判读

2.2 ApoE和SLCO1B1基因型和等位基因频率 ApoE基因型和等位基因频率：E2/E2型1.00%，E2/E3型12.47%，E3/E3型66.80%，E3/E4型16.50%，E2/E4型2.01%，E4/E4型1.21%；APOE等位基因频率：E2型8.25%，E3型 81.29%,E4 型10.46%。见表3。

SLCO1B1基因型频率：*1a/*1a型6.24%，*1a/*1b型30.18%，*1b/*1b型42.66%，*1a/*5型0.00%，*1a/*15型3.02%，*1b/*15型16.10%，*5/*5型0.00%，*5/*15型0.00%，*15/*15型1.81%；SLCO1B1等位基因频率：*1b型65.79%，*1a型22.84%，*5型0.00%，*15型11.37%。见表4。

表2 SLCO1B1基因型结果判读

表3 ApoE中526C>T与388T>C频率分布

表4 SLCO1B1中388A>G与521T>C频率分布

2.3 疗效良好组、疗效正常组和疗效不良组中SLCO1B1基因型的分布情况 根据ApoE基因型的他汀类药物疗效不同将其分为3个组，分别为疗效良好组(E2/E2、E2/E3)：*1a/*1a型10.45%，*1a/*1b型29.85%，*1b/*1b型41.79%，*1a/*5型0.00%，*1a/*15型2.99%，*1b/*15型14.93%，*5/*5型0.00%，*5/*15型0.00%，*15/*150.00%；疗效正常组(E2/E4、E3/E3)：*1a/*1a型5.85%，*1a/*1b型29.24%，*1b/*1b型43.86%，*1a/*5型0.00%，*1a/*15型3.22%，*1b/*15型15.50%，*5/*5型0.00%，*5/*15型0.00%，*15/*152.34%；疗效不良组(E3/E4、E4/E4)：*1a/*1a型4.55%，*1a/*1b型34.09%，*1b/*1b型36.36%，*1a/*5型0.00%，*1a/*15型4.55%，*1b/*15型19.32%，*5/*5型0.00%，*5/*15型0.00%，*15/*15 1.14%。见表5。

表5 疗效良好组、疗效正常组和疗效不良组患者中

3 讨 论

他汀类药物是一线调脂用药，如今得到广泛应用，其降脂疗效及其他效果显著降低了心血管疾病的发生风险。他汀类药物能有效抑制各类胆固醇的合成，特别对降低LDL-C水平有良好的效果，还具有改善血管内皮功能、抗血小板聚集、稳定粥样硬化斑块、抑制血栓形成和抑制平滑肌细胞增殖及迁移等其他多效性[2,5]。研究发现，ApoE基因多态性与他汀类药物疗效具有相关性[6-7]，ApoE4携带者患冠心病风险较高[8]，且他汀类药物对此类患者往往疗效不佳或无疗效，而ApoE3携带者疗效正常，对ApoE2携带者的降脂作用最强[9-12]；故本研究中按照ApoE基因型分为疗效良好组(E2/E2,E2/E3)、疗效正常组(E2/E4,E3/E3)、疗效不良组(E3/E4,E4/E4)，3组的比例分别为疗效良好组13.47%、疗效正常组68.82%、疗效不良组17.71%，ApoE等位基因频率为E2 8.25%，E3 81.29%，E4 10.46%。ApoE4等位基因频率为10.46%，疗效不良组比例为17.71%，ApoE4等位基因频率和疗效不良组比例都比较低；ApoE2和ApoE3等位基因频率共89.54%，疗效良好组和疗效正常组的人数占比82.29%，这说明重庆地区的高脂血症人群适合使用他汀类药物进行降脂治疗。

近年来，随着他汀类药物的广泛使用，其不良反应也引起了人们的关注[13]，患者服用他汀类药物后部分会出现胃肠道反应、肝功能异常、肌损害等不良反应，肌损害常见表现为无力、肌痛、肌炎，更严重的是出现横纹肌溶解征，这也是他汀类药物的最严重的不良反应[14-15]。SLCO1C1基因具有遗传多态性，其中388A>G，521T>C是两种常见的单核苷酸多态性，可以形成四种多态性SLCO1B1*1a(388A-521T)、*1b(388G-521T)、*5(388A-521T)、*15(388G-521C)。

SLCO1B1基因的突变会导致其编码的OATP1B1转运蛋白活性减弱[16]，表现为肝脏摄取药物能力降低，引起他汀类药物血药浓度上升，增加不良反应的发生风险，尤其521T>C和横纹肌溶解和肌病不良反应密切相关[17-21]。*1a/*1a型、*1a/*1b型、*1b/*1b型3种基因型为正常风险，比例为79.08%；*1a/*5型、*1a/*15型、*1b/*15型3种基因型为中等风险，比例为19.12%；*5/*5型 、*5/*15型 、*15/*15 型三种基因型为高度风险，比例为1.80%；SLCO1B1等位基因频率：*1b 65.79%，*1a 22.84%，*50.00%，*1511.37%。正常风险基因型占比很大且高度风险基因型只有1.80%，SLCO1B1*5和*15等位基因频率仅为11.37%，可看出重庆地区大多数高脂血症人群使用他汀类药物风险正常，小部分会有中等风险，高等风险极少。

本研究结果表明疗效良好组、正常组和不良组中SLCO1B1基因型分布整体均匀，没有显著差别。疗效良好组中*1a/*1a型、*1a/*1b型、*1b/*1b型3种正常风险基因型占82.09%，*1a/*5型、*1a/*15型、*1b/*15型3种中等风险基因型占17.91%，*5/*5型 、*5/*15型 、*15/*15 型3种高度风险基因型占0%；疗效正常组中正常风险基因型占78.95%，中等风险基因型占18.72%，高等风险基因型占2.33%；疗效不良组中正常风险基因型占75.00%，中等风险基因型占23.87%，高等风险基因型仅有一例并占1.13%。上述研究结果表明重庆地区高脂血症人群使用他汀类药物疗效良好或正常且不良反应正常风险的比例很高，疗效不良且中等风险有21例，疗效不良且高等风险仅有1例。综上所述，他汀类药物依然是重庆地区高脂血症大多数人群降脂治疗的合理药物，但应综合考虑患者的自身情况和个体化差异来调整用药类型和剂量。

4 结 论

根据重庆地区高脂血症人群中的APOE及SLCO1B1基因多态性的分布发现，该人群中对他汀类药物代谢正常(E3携带者)且转运正常(*1a 、*1b携带者)的人群占大部分比例；但是代谢慢(E4携带者)且转运异常(*5、*15携带者)的人群也占了一定比例，表明重庆地区的高血脂人群适合使用他汀类药物进行治疗，可通过基因型别调整药物剂量，以降低不良反应的发生，促进其合理利用。