韩菲菲，张佳婧，殷 皓，张晓峰，崔玉宝

(南京医科大学附属无锡人民医院检验科，江苏 无锡 214023)

支气管哮喘是由多种细胞、细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病，与其自身遗传、外界环境因素密切相关。近年来伴随全球大气污染等生态环境破坏的加剧，支气管哮喘发病率呈逐年升高的趋势，特别是在儿童时期多发。研究显示，我国儿童支气管哮喘患病率约为3%，并仍处于持续增长的趋势[1]。支气管哮喘的主要临床表现为反复发作的喘息、咳嗽、气促、胸闷，可伴有不同程度的呼气气流受限，其呼吸道症状的具体表现形式和严重程度可随病程迁延而变化，故早期诊断和及时治疗是改善支气管哮喘患儿预后的关键环节[2]。但是喘息是年幼儿童呼吸道疾病的常见共有临床症状，加之儿童具有特殊的生理解剖结构和免疫特点，因而儿童期支气管哮喘的诊断较为困难，目前尚缺乏针对年幼支气管哮喘患儿的统一诊断标准。在临床实践中，年幼儿童通常不易配合支气管激发、舒张试验及最大呼气流量每日变异率等检测，因此不能将这些常规检测项目作为诊断手段，而呼出气一氧化氮检测、呼出气冷凝液成分分析、气道重构影像学评价、表型分析等新型诊断方式的可靠性尚待进一步证实[3]。血常规是临床上最为常见的检测项目，可以详细地反映外周血成分的变化。相关研究提示[3]，支气管哮喘患儿会出现多项外周血细胞参数的异常，且对支气管哮喘的发病具有一定的指示性作用，但缺乏全面综合性研究。基于这一研究现状，本研究主要分析血细胞参数在儿童支气管哮喘中的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1—12月在南京医科大学附属无锡人民医院就诊的27例支气管哮喘患儿作为病例组，其中男13例、女14例，年龄1～14岁,平均(6.7±2.0)岁；同期选择年龄、性别相匹配的109名健康体检儿童作为对照组，其中男51例、女58例，年龄1～13岁,平均(6.2±2.8)岁。两组儿童性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究方案经南京医科大学附属无锡人民医院医学伦理委员会审核通过，两组入选儿童监护人均签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准 入组标准：病例组纳入标准参考中华医学会儿科学分会呼吸学组制订的儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2016年版)[4]，诊断依据为呼吸道症状、临床体征、肺功能指标检查，患儿具有反复喘息、咳嗽、气促、胸闷的临床表现，多存在接触变应原、物理化学性刺激、呼吸道感染、过度运动或通气等诱发因素，夜间或凌晨发作加剧，发作时查体可闻及双肺散在或弥漫性哮鸣音，呼气相延长。患儿症状和体征经抗哮喘治疗有效或可自行缓解，临床表现不典型者可出现可逆性气流受限、支气管舒张试验阳性、支气管激发试验阳性、最大呼气峰流量日间变异率增加、抗炎治疗后肺通气功能改善等表现。对照组儿童均经临床检查排除支气管哮喘，无哮喘病史及家族史，无过敏性疾病史，无其他系统性疾病。

排除标准：怀疑或已诊断为恶性肿瘤、血液系统疾病、自身免疫缺陷及除支气管哮喘外的其他变态反应性疾病；入组前1个月内应用免疫调节剂、糖皮质激素、抗血小板(platelet,PLT)制剂的儿童。

1.3 评价指标和检测方法 采集病例组、对照组儿童的空腹外周静脉血样本2～3 mL，乙二胺四乙酸二钾抗凝混合，15 min内应用Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪及其配套试剂对外周血白细胞(white blood cell，WBC)、嗜碱粒细胞(basophil,BA)、嗜酸粒细胞(eosinophil,EO)、淋巴细胞(lymphocyte，LY)、单核细胞(monocyte，MO)、中性粒细胞(neutrophil,NE)、红细胞(red blood cell，RBC)、红细胞分布宽度(red blood cell distribution width，RDW)、血细胞比容(hematocrit，HCT)、血红蛋白(hemoglobin，Hb)、红细胞平均血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)、红细胞平均体积(mean corpuscular volume,MCV)、PLT、血小板压积(platelet hematocrit,PCT)、血小板平均体积(mean platelet volume,MPV)等血细胞参数指标进行检测和比较，记录结果。

2 结 果

2.1 两组儿童外周血细胞参数指标的比较 与对照组相比，病例组患儿的WBC、EO、MO、NE、PLT、PCT、MPV水平显著升高，BA、MCV水平显著降低(P<0.05)；而两组LY、RBC、RDW、Hct、Hb、MCH、MCHC比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

组别例数WBC(×109/L)BA(×109/L)EO(×109/L)LY(×109/L)MO(×109/L)NE(×109/L)RBC(×1012/L)RDW(%)对照组1096.48±1.420.50±0.170.14±0.022.23±0.630.43±0.123.64±0.974.71±0.4513.14±0.80病例组278.16±2.780.34±0.110.29±0.082.19±1.440.50±0.135.16±2.944.77±0.5412.88±0.75t值3.0593.9892.4900.1372.7502.6400.5631.563P值0.005<0.0010.0190.8920.0070.0140.5740.121组别例数HctHb(g/L)MCH(pg)MCHC(g/L)MCV(fL)PLT(×109/L)PCT(%)MPV(fL)对照组1090.42±0.04139.67±14.2428.65±1.56334.60±5.2688.58±4.10210.17±49.600.18±0.038.90±1.08病例组270.41±0.05137.96±19.1028.94±2.31334.07±15.9586.53±4.27260.00±92.920.27±0.0910.36±0.81t值0.5460.5191.5140.1712.3062.6934.8906.552P值0.5860.6050.1400.8660.0230.012<0.001 <0.001

WBC:白细胞；BA:嗜碱粒细胞；EO:嗜酸粒细胞；LY:淋巴细胞；MO:单核细胞；NE:中性粒细胞；RBC:红细胞；RDW:红细胞分布宽度；HCT:血细胞比容；Hb：血红蛋白；MCH:红细胞平均血红蛋白量；MCHC:红细胞平均血红蛋白浓度；MCV:红细胞平均体积；PLT:血小板；PCT:血小板压积；MPV:血小板平均体积；对照组：健康体检儿童；病例组：支气管哮喘患儿

2.2 血细胞参数指标在诊断儿童支气管哮喘中的价值对比 区别于对照组，各指标对支气管哮喘儿童的诊断效能比较，MO、MPV、NE、PCT、PLT、WBC、BA、MCV在诊断儿童支气管哮喘中的AUC差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示，MPV、PCT、BA的AUC分别为0.871、0.830、0.756，具有最佳的诊断效能。在Cut-off取值下，MPV的诊断灵敏度(0.963)最高，PCT的诊断特异度(0.881)最高。见表2、图1、图2。

表2 血细胞参数指标在诊断儿童支气管哮喘中的价值比较

EO:嗜酸粒细胞；MO:单核细胞；NE:中性粒细胞；WBC:白细胞；PLT:血小板；MPV:血小板平均体积；PCT:血小板压积；BA:嗜碱粒细胞；MCV:红细胞平均体积；-：AUC差异无统计学意义，无必要计算Cut-off值

EO:嗜酸粒细胞；MO:单核细胞；NE:中性粒细胞；WBC:白细胞；PLT:血小板；MPV:血小板平均体积；PCT:血小板压积；ROC:受试者工作特征曲线

图1 EO、MO、MPV、NE、PCT、PLT、WBC诊断儿童支气管哮喘的ROC曲线

BA:嗜碱粒细胞；MCV:红细胞平均体积；ROC:受试者工作特征曲线

图2 BA、MCV诊断儿童支气管哮喘的ROC曲线

3 讨 论

粒细胞表达异常是支气管哮喘的重要表现之一，不同粒细胞表达水平决定着支气管哮喘的临床类型和病情转归。近年来报道显示,急性支气管哮喘或持续性支气管哮喘患儿，尤其是对糖皮质激素治疗反应差的支气管哮喘患儿，机体外周血中可出现C反应蛋白和WBC等炎症指标升高[5]。WBC水平与支气管哮喘患儿IgE、白细胞介素-13、肿瘤坏死因子-α等炎症因子诱导的气道炎症反应密切相关，且在支气管哮喘急性发作时这些炎症指标会显著升高，参与支气管哮喘发生、发展的病理过程，并与治疗效果具有相关性[6]。进一步研究发现，机体内的气道炎症反应以NE诱导为主，受Th17细胞和Th1细胞亚群调节，但与Th2细胞亚群无相关性；Th17/调节性T细胞失衡、Kruppel样因子2/转录因子RelA(p65)基因表达比例失衡、白细胞介素-17、转录因子维甲酸相关孤儿核受体γt和B细胞活化转录因子表达异常等机制可能共同参与NE性支气管哮喘患者的气道炎症和高反应性形成的病理进程[7]。本研究结果显示，与对照组相比，病例组EO、MO、MPV、NE、PCT、PLT、WBC显著升高，BA、MCV显著降低，阐明了炎症细胞紊乱与儿童支气管哮喘密切相关，可能为指示支气管哮喘发病的潜在标志物。相关研究证实，EO升高的支气管哮喘患儿多为IgE介导，患儿的气道阻力和气道反应性均高于EO水平正常的患儿[8]，EO中P物质和神经激肽1受体的过表达也在变应性鼻炎合并支气管哮喘的病理过程中发挥重要作用[9-10]，而在支气管哮喘患儿的气道局部还存在白细胞介素-5、白细胞介素-10等细胞因子诱导的EO凋亡现象[11]。外周血MO表面Toll样受体4的激活能够诱导白细胞介素-6等细胞因子的表达[12]，从而参与小儿支气管哮喘的转变过程，而支气管哮喘发作期患儿外周血MO中肿瘤坏死因子诱导蛋白能够通过诱导白细胞介素-4、IgE的表达参与支气管哮喘急性发作过程[13]。

支气管哮喘是一种高度异质性疾病，不同亚型患儿WBC系统各成分的表达状态可能存在显著差异[14]，而且WBC系统成分的变化还会受多种混杂因素的影响，因而依据检测粒细胞、MO等WBC指标诊断支气管哮喘的灵敏度和特异度均无法满足临床需求。近年来报道显示PLT不仅具有止血功能，也可参与炎症反应[15]。在化脓性感染时，活化的PLT能够增强WBC的聚集能力而发挥促炎作用；在侵入性真菌感染时，PLT可发挥抑菌和促进真菌传播的双重效应；在过敏性炎症时，过度活化的PLT能够使气道障碍加剧从而导致肺功能的损害[16]。过敏和感染均是引发儿童支气管哮喘的常见诱因，而这也是导致支气管哮喘患儿多种PLT异常的重要因素。研究表明,支气管哮喘合并感染性肺炎患儿的PLT指标显著高于单纯支气管哮喘和单纯感染性肺炎患儿[17]。本研究结果显示，支气管哮喘患儿PLT、MPV、PCT显著升高，特别是MPV在诊断支气管哮喘中具有较高的价值。国内关于支气管哮喘儿童PLT指标改变的研究较少，有报道显示儿童支气管哮喘急性发作期的外周血MPV水平高于慢性持续期和健康对照人群，MPV水平的升高可能与支气管哮喘的急性发作和病情加重具有相关性[18]。但也有研究证实，与稳定期支气管哮喘患儿和对照人群相比，加重期支气管哮喘患儿的MPV水平更低，MPV水平与C反应蛋白、WBC等炎症标志物水平呈负相关[19]。虽然PLT在支气管哮喘的病理生理过程中具有一定作用，但检测MPV不足以反映与PLT相关的炎症反应状态[20]。

综上所述，支气管哮喘患儿血细胞参数表现为粒细胞、MO、PLT指标的显著异常，均可作为辅助诊断支气管哮喘的潜在指标，其中MPV的诊断价值较高，但具体机制有待进一步大样本研究证实。