刘志强 褚艳杰 刘 静 王彦博

肺癌是呼吸系统常见的恶性肿瘤，发病率及死亡率逐年升高，5年生存率在4%～17%之间[1]。肿瘤的发生和发展与免疫系统不能产生有效的抗肿瘤免疫反应有关[2]。MyD88是天然免疫受体TLR4信号转导通路的接头蛋白，TLR4与MyD88共同表达，通过激活多种促炎细胞因子和抗凋亡蛋白影响肿瘤患者的生存期及预后[3-4]。白术内酯Ⅰ(AtractylenolideⅠ)是从白术中提取的天然倍半萜内酯，已经用于抗炎和癌症治疗。临床研究表明，白术内酯Ⅰ可以改善胃癌患者食欲和(Karnofsky，KPS)评分，且副作用少[5]。但有关白术内酯Ⅰ对肺癌的作用研究甚少，其分子机制研究尚不清楚。

因此，本研究探讨TLR4/MyD88在肺癌组织中的表达情况，并将白术内酯Ⅰ作用于人肺癌A549细胞，通过检测细胞活力、细胞侵袭及TLR4/MyD88通路相关蛋白，阐明白术内酯Ⅰ抑制肺癌细胞增殖侵袭的作用机制，为白术内酯Ⅰ的临床应用提供依据。

1 材料和方法

1.1 肿瘤组织样本

选取2017年8月—2018年8月在哈尔滨医科大学附属肿瘤医院就诊的28例患者手术切除的肺癌组织及癌旁组织。病理诊断由哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理科完成。所有患者均签署了书面知情同意书。本研究经哈尔滨医科大学伦理委员会批准。

1.2 细胞培养及分组处理

人肺癌A549细胞系购自中科院上海细胞库。细胞置于10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中培养。白术内酯Ⅰ购于MCM®小分子网站(http：//www.medchemexpress.cn/)，溶解于DMSO中。细胞分组为：(1)白术内酯Ⅰ处理组：给予100 μM/L白术内酯Ⅰ；(2)对照组：给予相应浓度DMSO，作为对照组。

1.3 RNA提取和定量RT-PCR

使用TRIzol试剂(Invitrogen)按照说明书从肺癌组织及癌旁组织中提取RNA。……