卢巧梅

(福州大学 测试中心，福州大学食品安全与生物分析教育部重点实验室，福建 福州 350116)

蓝藻水华是常见的淡水水华现象，产生的毒素以微囊藻毒素(MCs)最普遍且危害最大[1-2].大量藻毒素的存在不仅影响生态环境，还会通过食物链富集和传递，影响淡水养殖业并威胁人类健康.MCs是一类由7个氨基酸残基组成的环状多肽化合物.目前已发现了几十种该类毒素，其中MC-RR、MC-LR和MC-YR最具有代表性，其测定技术包括生物学法、免疫检测法和化学分析法等[3].化学分析法中，HPLC是推荐的MCs测定方法.痕量毒素通常需要先浓缩富集再经 HPLC-UV法直接测定[4-5].此法结合质谱检测器，方法的灵敏度和定性准确性明显提高，但较大的进样量和较低的柱效在常规HPLC-MS或HPLC-MS/MS中略显不足[6-7].因此，开发一种高效、样品消耗少的MCs检测方法仍具有实际意义.

芯片色谱技术把传统色谱柱浓缩成约数厘米长、数毫米厚的芯片，再通过激光镭射技术在色谱芯片上刻出分析通道，并填充C18、C8等固定相.该微型化装置可明显降低流速、减少柱体积，从而提高方法灵敏度[8-9].目前芯片液相色谱-质谱(nano-flow chip liquid chromatography-high resolution mass，nano-flow chip LC-MS)技术已成功应用于蛋白质、肽类等生物样品分析[10-12]，但较少用于小分子化合物领域[13-15]，在MCs定量监测中也鲜见报道.

本文将芯片液相色谱和高分辨质谱技术相结合，建立了同时检测 MC-RR、MC-LR和MC-YR的nano-flow chip LC-MS新体系.方法快速可靠，仅pg级的进样量也获得了较高的灵敏度.

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

Nano-flow chip LC-MS联用系统(Agilent,USA)包括纳流液相色谱(1200 Nano HPLC)、接口(Chip Cube)和四级杆-飞……