李松涛，赵红玲，常安琪，祁 麟

（承德医学院中药研究所/河北省中药研究与开发重点实验室，河北承德 067000）

研究表明，转铁蛋白受体（transferrin receptor，TfR）在一些肿瘤细胞表面呈现过表达现象，而在正常细胞表达量很低[1-2]，这种差异化表达提示TfR可能成为肿瘤治疗的作用靶点。噬菌体展示技术是筛选肿瘤靶向多肽的主要方法之一[3]。DAI等[4]利用噬菌体展示技术筛选到一条对TfR具有高亲和力的多肽BP9，随后他们又制备了一种BP9氮末端连接麻风树毒蛋白的融合蛋白，并发现该融合蛋白对肝癌细胞具有显著的增殖抑制活性，而对正常肝细胞没有影响[5]，这一结果提示BP9可能成为肿瘤细胞靶向给药的载体。

本课题组前期研究设计并合成了一种BP9氮末端连接半胱氨酸的类似物BP9a，通过引入活性反应基团巯基实现BP9的靶向载体功能。本文进一步对BP9a固相合成条件中的缩合体系和裂解试剂进行优化，以期提高BP9a粗肽的纯度和收率，并为肿瘤细胞靶向多肽的规模化制备提供依据。

1 仪器、试剂与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 仪器：U3000型高效液相色谱仪（美国Thermo Fisher公司）；Heal Force纯水机（香港力康公司）；TDL-40B型高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；AR224CN型分析天平（美国奥豪斯仪器上海有限公司）；DF-101S型加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.1.2 试剂：2-CTC树脂（天津南开合成科技有限公司，取代度1.3mmol/g）；Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH（成都诚诺新科技有限公司）；O-苯并三氮唑-N, N, N", N"-四甲基脲六氟磷酸盐（HBTU）、1-羟基苯并三唑（HOBt）（苏州中科天马肽工程中心有限公司）；N, N"-二异丙基碳二亚胺（DIC）、N,N"-二异丙基乙胺（DIPEA）（苏州昊帆生物科技有限公司）；……