王幸，曾慧林，张祥贵，汤杰印

狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）是系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）严重并发症之一，也是其死亡的主要原因。目前认为LN的发病主要是肾脏细胞增殖与凋亡失衡（表现为增殖过度，凋亡不足）所致［1］。商陆皂苷甲（esculentoside A，EsA）是从中药商陆中提取出的主要成分之一，具有抗炎、免疫调节、抑制细胞增殖和促凋亡的作用［2］。课题组前期研究发现EsA 能显著改善LN 小鼠的尿蛋白及肾脏病理表现，随后对其机制进行探讨，发现EsA 可抑制辅助性 T 细胞 17（T helper cell 17，Th17）的分化，从而降低白细胞介素（IL）-17 的表达，抑制IL-17 诱导的肾小球系膜细胞增殖［3-7］。iTr35（CD4+Foxp3-IL-12p35+IL-27EBI3+）细胞是最新发现的调节性T细胞亚群，由IL-35诱导人或小鼠初始T细胞转变而成，具有强大的免疫抑制功能［8-9］，通过分泌特征性细胞因子IL-35发挥作用。IL-35是IL-12家族成员之一，由p35 亚基和EB 病毒诱导基因3（Epstein-Barr virus-induced gene3，EBI3）亚基组成的异源二聚体（IL-12p35/IL-27EBI3），在体内外均可抑制 Th17 细胞的分化，减少 IL-17 的分泌［10-11］。课题组前期体外实验发现EsA 对IL-17 有抑制作用，因此，本次实验以MRL/lpr 狼疮肾炎模型小鼠为研究对象，观察EsA 对MRL/ipr 小鼠体内IL-35、IL-17及iTr35表达的影响，从体内实验进一步证实EsA对IL-17的作用，明确EsA对IL-17的抑制是否通过IL-35来调节。

1 材料与方法

1.1 实验材料 （1）实验动物。16周龄雌性MRL/lpr小鼠24只，体质量（25±2）g，由美国Jackson 实验室提供，动物许可证：SCXK（苏）2016-0010。（2）药品与试剂。商陆皂苷甲（纯度＞98%，编号SE8230）、HE 染色试剂盒（编号G1120）、Masson 染色试剂盒（编号G1345）购自北京索莱宝科技有限公司；RPMI 1640 培养液（编号TBD724000）购自武汉华联科生物技术有限公司；IL-12p35单克隆抗体（编号MAB1570）购自R & D公司；尿蛋白检测试剂盒（编号CO35-2）、肌酐测定试剂盒（编号CO11-2）购自南京建成生物科技有限公司；……