林楚怡，张春荣，沈志滨

(广东药科大学中药学院，广东 广州 510006)

香鳞毛蕨Dryopterisfragrans(L.)Schott是鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，对多种皮肤病具有良好治疗作用[1-2]，其醇提液对红色毛癣菌(Trichophytonrubrum)等多种真菌有较好的抑制作用[3-5]。

随着生物技术的发展，高通量测序技术在揭示药物作用机理的研究中也得到快速的发展，并形成一种新药作用机制研究的新思路和新方法，通过其对新药作用机制展开的转录组学的研究，增加对新药作用机制的了解[6-8]。

本文利用RNA-seq技术研究红色毛癣菌在香鳞毛蕨乙醇提取物(DF)作用前后基因差异表达，揭示香鳞毛蕨乙醇提取物对红色毛癣菌的抑菌机制，为香鳞毛蕨的新药研发提供理论依据和研究途径。

1 材料

1.1 药物

香鳞毛蕨药材采自黑龙江省五大连池，由哈尔滨商业大学药学院张德连教授鉴定为香鳞毛蕨Dryopterisfragrans(L.)Schott。盐酸特比萘芬原料药，购自济南明鑫制药股份有限公司，质量分数>98%。

1.2 菌株

红色毛癣菌标准株CMCC(f)T1a、平滑念珠菌(ATCC22019)购于中国医学科学院南京皮肤病研究院。

1.3 培养基

沙氏琼脂培养(SDA，批号：20160926)、MOPS(批号：20160926)均由广州瑞舒生物科技有限公司生产。RPMI Medium 1640(批号：785914)由美国Gibco有限公司生产。

2 方法

2.1 药物贮备液的制备

2.1.1 香鳞毛蕨乙醇提取物的制备 称取100 g香鳞毛蕨药材粗粉，90 ℃下用12倍量体积分数50%的乙醇提取3次，合并提取液，浓缩至无醇味，并加水定容至200 mL，制成质量浓度为0.50 g/mL的香鳞毛蕨乙醇提取物贮备液，备用。

2.1.2 盐酸特比萘芬贮备液的制备 精密称取160 mg盐酸特比萘芬原料药，加入10 mL二甲基亚砜溶解，制成质量浓度为16 mg/mL的阳性对照药贮备液，备用。