李 渊，唐 岩，李 忠，丁 波

(南阳市第一人民医院普外科，河南 南阳 473000)

光动力学疗法(photodynamic therapy，PDT)是一种新型物理响应性肿瘤辅助疗法，其作用机制是光敏剂吸收能量后跃迁至激发态，进而将能量传递给氧分子生成活性氧(reactive oxygen species，ROS)，ROS能够直接氧化细胞内的脂质、蛋白质和DNA，从而达到抑制肿瘤细胞增殖的目的[1-2]。研究表明，乏氧是恶性实体肿瘤的常见特征，肿瘤细胞通过信号转导通路诱导下游基因的表达，使细胞适应低氧环境，继续增殖，并具有高侵袭和转移能力，且对放射治疗和化学治疗产生耐受性，这也是导致肿瘤治疗失败的主要原因之一[3-4]。PDT作为一种非侵入性治疗方式，涉及光敏剂、ROS及激光刺激。由于PDT治疗过程会加重肿瘤部位的乏氧情况，该治疗方式在临床应用中受到严重限制[5-6]。因此，克服肿瘤乏氧环境对提高PDT的治疗效果具有极其重要的意义。替拉扎明(tirapazamine，TPZ)作为乏氧细胞毒性药物，对乏氧细胞具有特异的细胞毒性，近年来备受关注。TPZ进入乏氧肿瘤细胞后可被细胞内的还原酶还原成一种高活性自由基，该自由基可与细胞内DNA结合，破坏DNA结构，从而导致细胞死亡，但对常氧状态下的正常细胞无损伤[7]。本研究拟利用PDT和TPZ对氧分压的依赖特性，探讨光敏剂二氢卟吩e6 (chlorin e6，Ce6)介导的PDT联合乏氧化学治疗药物TPZ对人乳腺细胞的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器人乳腺癌MCF-7细胞(目录号：TCHu74，购自中国科学院细胞库)；TPZ(美国Sigma-Aldrich公司)，Ce6(国药集团化学试剂有限公司)，青霉素、链霉素(北京雷根生物技术有限公司)，RPMI 1640细胞培养基(美国Gibco公司)；……