碳量子点的制备及其在半胱氨酸比色测定中的应用
2019-05-13文辉忠梁英彩肖程月邱子情李娟
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摘 要 以荔枝皮为原料制备碳量子点(CQDs),此CQDs具有类过氧化物酶活性,可催化H2O2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,而半胱氨酸(CySH)能还原TMB的氧化产物(ox-TMB)使其褪色。基于上述原理,建立了以CQDs为类过氧化物酶的CySH测定方法。以TMB为底物,考察了pH值和温度等因素对CQDs催化性能的影响。实验结果表明,当TMB浓度为0.25 mmol/L时,在pH=3.5、反应温度40℃、反应时间10 min、 0.5 mmol/L H2O2及 0.5 μg/mL CQDs等条件下,体系吸光度的减少值(ΔA)与半胱氨酸浓度在0.05~4.00 μmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.02 μmol/L(3σ/k)。血清中的常见氨基酸不干扰测定,实际血清样品中半胱氨酸的加标回收率为94.0%~104.0%。
关键词 碳量子点; 模拟酶; 半胱氨酸
1 引 言
半胱氨酸(CySH)是组成人体蛋白质的氨基酸中唯一具有巯基的氨基酸,它是生物体内的还原剂,参与蛋白质和谷胱甘肽的合成,具有保护细胞免受毒物损害等功能,是与疾病相关的一种重要的生理调节因子[1~3]。因此,对半胱氨酸含量进行分析测定具有重要意义。目前,有关半胱氨酸含量的测定方法主要有高效液相色谱法[4]、气相色谱-质谱联用法[5]、毛细管电泳法[6]、荧光法[7]及电化学法[8]]等。这些方法具有选择性好、灵敏度高等优点,但需要昂贵的仪器或冗长的样品预处理、复杂的操作过程。因此,发展简单、快速、廉价的半胱氨酸测定方法很有必要。近年来,随着纳米科学和纳米技术的不断发展,纳米材料在分析测定中的应用日益广泛。基于金或银纳米粒子团聚后发生颜色变化的光度分析法已應用于半胱氨酸的定量测定[9,10]。……
