张 乐

(承德医学院附属医院胸外科,承德067000)

非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)占肺癌发生的85%[1,2]，发病率和死亡率逐年增加，给患者家庭和社会带来了沉重的负担。尽管伴随着小分子靶向治疗药物的问世，耐药现象的出现[3,4]，NSCLC患者的五年生存率未得到明显的提高，因此对NSCLC发生发展机制的探索迫在眉睫。既往研究表明[5,6]，有些抑癌基因因自身CpG岛甲基化而被沉默进而诱发肿瘤的发生，因此对于该抑癌基因甲基化的测定对肿瘤的临床诊疗尤为关键。人类Runt相关转录因子3(Human Runt relationed transcription factor 3，RUNX3)是近年来被确定的一个抑癌基因[7]。新近研究报道称[7-10]，RUNX3基因启动子在肺癌、结直肠腺癌、胃癌及乳腺癌等组织中甲基化水平明显增加，进而导致RUNX3基因沉默而失去活性，在肿瘤的发生发展过程中扮演者重要的角色。本研究拟采用巢氏甲基化特异性PCR(nMSP)法检测RUNX3启动子甲基化情况；链霉菌素-生物素过氧化物酶(S-P)染色法检测肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达并计数，并回顾性分析RUNX3启动子甲基化状态与临床病理特征、肿瘤侵袭相关基因表达的关系。

1 资料与方法

1.1资料

1.1.1临床资料 以我院2017年1月至2018年1月期间收治入院的65例非小细胞肺癌患为研究对象，采集病理组织样本和临床资料。其中，男性患者44例，女性患者21例，年龄41～75岁，平均年龄58.2岁。所有组织标本均以病理学诊断为金标准，其中鳞癌26例，腺癌39例，均未进行放化疗。临床分期结果显示，Ⅰ期6例，Ⅱ期7例，Ⅲ期23例，Ⅳ期29例。所有实验均在我院伦理委员会审核后进行。

1.1.2试剂及引物 DNA纯化……