黄 晶 丛 晶 李 威 高敬书 张多加 常 慧 马红丽 杨新鸣 王 宇 吴效科

（黑龙江中医药大学附属第一医院妇一科，黑龙江 哈尔滨 150040）

黑龙江中医药大学附属第一医院是国家中医临床研究基地，妇科以多囊卵巢综合征、先兆流产、盆腔炎等为优势病种，开展了全国多中心、大样本的深入研究。妇科疾病发生发展的机制、个性化治疗方案、疗效的随访、药物敏感性研究及新药研发等离不开大量的生物样本［1］，为适应科研的需要，我院自2017年派送专业人员外出学习，建立妇科生物样本库，相继购置了-80℃超低温冰箱、卧式超低温保存箱、整理架、冻存管、冻存盒、EDTA管（紫管）、促凝管（红管）、移液器套装（德国Eppendorf公司）、可调速台式离心机、HDL洁净工作台、KFR-72LW/09YBA13海尔空调、生物样本库智能信息管理系统、低温条码打印机、扫码机等，将血样本进行入出库管理。通过积极采集和储存妇科疾病血样本，对其进行质量监测和规范、科学化的管理，为妇科疾病的基础和临床研究提供高质量生物样本资源。

生物样本库又称生物银行，是遵照国际标准化指南，收集、处理、储存和应用生物样本以及与这些生物样本相关的临床、病理、治疗、随访、知情同意等资料及其质量控制、信息管理与应用系统。生物样本库作为基础研究成果向临床应用转化的平台，在疾病诊断、新药研发、疾病相关基因检测及流行病学研究中均有重要作用。

我院妇科生物样本库现为初级建设阶段，设有专职工作人员，负责血样本的收集、处理、冻存等日常工作，制定了操作技术流程及管理制度；动态记录血样本收集、标识、分装、出入库、质控等过程及相关数据，通过唯一编码关联血样本的空间位置及相关信息。

吴效科老师主持的国家中医药管理局“中药复方与微粉化黄体酮对先兆流产妇女活产的影响”项目已经启动，全国各个分中心已派研究助手进行培训，将预先粘贴随机号的冻存管及冻存盒邮往各个分中心。待血样收集完毕，将通过冷链公司，血样及受试者血样采集登记表（受试者编号、入组时间、治疗前后采集时间及血样本冻存数量），一并运回中心生物样本库。现以此项目为例，介绍如下。

1 血样本采集前程序

妇科生物样本库的建立已通过黑龙江中医药大学附属第一医院伦理委员会审核，采集计划由临床科室、样本库工作人员共同制定并挑选一名临床研究助手，每次采集病例由临床医生确定并签署知情同意书，一式3份，由临床科室、生物样本库、患者各执1份留存。

2 血样流程管理

2.1 血样本采集流程 （吴效科老师中药复方与微粉化黄体酮项目）：

2.1.1 留取血样之前的准备 （1）材料要求：①全血采集材料：静脉采血材料、1×4 mL EDTA管（紫管）、3×1.8 mL冻存管（红盖）、冻存盒（黄色、绿色）、一次性血清吸管（任何大小都行）；②血清采集材料：静脉采血材料、1×5 mL促凝管（红管）、4×0.5 mL冻存管（蓝盖）、冻存盒（黄色、绿色）、一次性血清吸管（任何大小都行）。（2）设备要求：可调速台式离心机；-80℃冰箱或-20℃无霜冰箱。

2.1.2 留取血样（空腹） （1）首先确认受试者是否处于空腹状态，如未空腹可重新安排采血时间。若因其他特殊原因无法另行安排，应在采血记录卡上注明“未空腹”；（2）受试者取坐位，若自觉头晕可靠在椅子上或躺在床上；（3）如果采血不成功，需要重新安排采血时间。2.1.3处理血样的规范性操作步骤 （1） 全血采集方法（采用静脉采血方式）：采集每个受试者的血液，将全血装在1个4 mL的紫盖抗凝管中（包含EDTA），颠倒混匀抗凝管8～10次（避免溶血），充分混匀EDTA和全血，保证抗凝效果；用吸液枪将全血转移至全血冻存管中，每管1 mL，每人份3管。冻存管已预先粘贴随机号，根据每个受试者的随机号，在全血冻存盒中选择对应随机号的冻存管。同时在“受试者血样采集登记表”上详细记录受试者编号、入组时间、治疗前后血样本采集时间及血样本冻存数量。血样本先由分中心保存在-20℃或者-80℃的冰箱中（-20℃最长保存时间为3个月或-80℃可长期保存）直至3个月后邮寄到中心样本库。

（2） 血清采集方法（采用静脉采血方式，空腹采血）：安排受试者在早晨 7:00—10:00采血。采2个红管，每管4 mL上下轻摇管子5次（避免溶血），室温下至少静置30分钟后进行离心，静置时间最长不得超过 2 h。离心条件：3000 rpm，20 min。用一次性吸管将上清取出，移至血清冻存管中，0.5 mL需采集4管。冻存管已预先粘贴随机号，根据每个受试者的随机号，在血清冻存盒中选择对应随机号的冻存管。同时，在受试者血样采集登记表上详细记录受试者编号、入组时间、治疗前后血样本采集时间及血样本冻存数量。最后将冻存盒放在-80℃或-20℃冰箱中。

2.2 血样本的运输 所有生物样本都被视为具有潜在生物危害风险，样本的包装和运输应严格遵循国家的相关规定［2］。从各个分中心回收的血样本必须由冷链公司干冰包埋进行运输。

2.3 信息系统 采用生物样本库智能信息管理系统，打印机、扫码机、条码采用低温二维码打印，并于标签显示其样本编码、采集日期、类型、存储方式以及存储位置等。例如，CHOP-IT-1800910-BS-F-02，代表先兆流产，2018年第9月10号入库，血清，冰冻存储，第二复份。

2.4 血样本的保存 血样本应保存在 －80℃超低温冰箱中。并记录样本保存的位置和状态。保存的样本应定期进行追踪和核对，并对其外部和内部环境进行监控。

2.5 血样本的清理与销毁 对没有利用价值的血样本进行清理和销毁，可以节约超低温冰箱的存储空间，降低样本保存成本。待销毁的样本应作为医疗垃圾，严格依照相关法律法规进行销毁。样本信息管理系统应做好相关记录［2］。

3 质量控制

定期对库内样本随机抽查进行质量控制，对样本的位置信息、临床信息（患者基本信息、诊断、治疗、辅助检查、跟踪随访）的规范性及完整性进行抽查，听取反馈结果。

对收集的样本进行质量控制，是生物样本库管理和运行的基本要求，包括样本采集、分装、入库、出库整个过程中对样本质量的监控，避免样本出现污染、降解等质量问题.不同来源、不同使用方式的样本，其具体的质量要求可能有所差别，能够客观反映取材组织细胞当时病理、生理状态下的分子信息［3］。开展有效的质量管理，严把质量关是样本库运营过程的关键所在。

4 信息化管理

生物样本库的信息化管理包括日常保存的样本信息以及与样本相关的临床信息管理，是样本库建设中的重要组成部分，也是样本库科学管理和样本资源科学利用的关键［4］。信息化系统包括受试者知情同意，样本的采集、处理和入库时间；对样本存放位置进行自动分配、查找和追踪；冰箱和环境的实时温度；样本出库和冻融次数；质控报告等。我院妇科项目组数据库存储生物样本库的血样本的临床信息，为血样本的重要组成部分。

5 与转化医学的关系

高质量、高水准的生物样本是人类重大疾病基因组、功能基因组、蛋白质组等基础、临床研究与分子诊断标志物、药物靶点研发、健康研究的最珍贵资源与关键环节，也是众多研究成果快速实现产业化，即“转化医学”应用到临床如疾病预测、早期诊断、分子分型与个性化治疗、预后评估的重要保证，毫无疑问也是生物医药产业自主创新体系中至关重要的环节与保证，更是生物医药产业发展的重要基石和源泉［5］。倡导以患者为中心，强调基础研究人员与临床医生的密切合作，以提高医疗总体水平。来源于医院患者的生物样本库是开展转化医学研究的重要基础［6］。转化医学一直是近年来国际医学健康领域的热门研究方向，生物样本库更是开展转化医学研究的重要基础，建立高质量的生物样本库，大规模、高效地搜集和利用生物样本，通过整合获得更加完整、全面的生物样本信息数据，对于提高科研效率具有极大的帮助［7］。

6 讨论

标准化的流程、完善的质量控制体系、严格的纳入/排除标准以及规范的信息化管理平台是样本库建设的关键，也是实现多中心、跨区域资源共享的前提。整合、共享与智能化管理是生物样本库发展的必然趋势［8］。

生物样本库的建立，能将临床的大量有效样本统一化、标准化、规范化地采集、处理，使临床疾病样本能够更加有效利用，基础研究样本来源更加可靠快捷。因我国现阶段面临的问题：①样本质量参差不齐，会导致系统误差，严重影响后续研究的可重复性。②组学数据与医疗数据割裂，表现为数据分散保存、共享水平低。

我院妇科生物样本库现为建设初期，应不断完善样本库的建设。由“解决样本的存储问题”，逐步向“样本的质量问题”“样本的信息化问题”“大数据建设问题”迈进。

在不断整合自身资源的同时，利用与国内外多个分中心建立起的长期良好合作关系，深入开展不孕不育等妇科疾病的基础研究，提高研究交流平台，以期更好地为妇科疾病的中医药临床研究服务。