蔬菜中有机磷农药分光光度检测法的研究

2019-01-21渠柏艳张哲

西部论丛 2019年3期

渠柏艳　张哲

摘要：研究的目的主要针对有机磷农药残留检测方法的探讨，可以找到一种操作简单、耗时短、价格低廉、实验结果良好，稳定性较好、可行性高，以解决现有检测方法的高成本、难操作等问题。本研究利用化学发光及分光光度法，以有机磷农药乐果为标的物，通过对磷钼蓝比色法的反应条件进行改进和优化，以磷酸二氢钾作为磷标准溶液，优化溶液中盐酸、钼酸铵、无水乙醇、L-抗坏血酸的用量，建立磷浓度与吸光度线性关系。在此基础上，研究了有机磷农药转化为正磷酸的条件，并将其用于蔬菜中有机磷农药的定量检测。

关键词：磷钼蓝比色法；农残检测；分光光度法；化学发光

近年来由于农药的大量使用致使食品的农药残留问题倍受关注，提高农药残留分析检测技术是解决农药残留问题的前提。有机磷类农药因为高速有效、广谱适用等特点，被广泛应用，但它高残留、毒性强同时残留期较长、会在动物体内产生蓄积等问题，导致有机磷农药现在虽然已经被国家禁止使用，但它的残留检测仍是农产品检测重要的一環。

目前常用的农残检测方法有气相色谱法[1，2]、酶抑制法[3，4]、荧光光度法[5-7]等，但这些方法检测成本高、不易操作等，所以普遍的农残检测需要一种简便、快速的方法，更有利于推广使用。

1.主要仪器与材料

在721E型紫外-可见分光光度计进行分光光度法检测，利用LDZX-50KB立式压力蒸汽灭菌器将有机磷成分转化为无机磷，在HH6-数显恒温水浴锅进行反应。采用50%乐果农药（乳油）为主要检测对象。

2. 研究方法的原理

钼蓝比色法测定磷化合物，在酸性条件下，钼酸铵与正磷酸结合，生成淡黄色的磷钼酸铵，其高价的磷钼酸铵具有氧化性，可被抗坏血酸还原成蓝色化合物。生成的钼蓝在特定的波长下有最大吸收。基于此原理，采用钼蓝比色法，测定磷化合物含量。乐果农药中的有机磷经高温高压，与强氧化剂K2S2O8反应，将有机磷化合物转化为无机磷化合物。本实验通过磷钼蓝比色法测定磷浓度，进而转换为农药浓度，实现对蔬菜中含磷有机农药（极性农药）的检测。

3.最大吸收波长的确定

按先后顺序依次加入磷标准溶液，5%钼酸铵溶液，无水乙醇，摇匀，溶液成淡黄色后，加入HCl， L-抗坏血酸，室温静置，在600nm—900nm范围内，每隔10nm测一次吸光度，做λ—A曲线，该实验条件下，最大吸收波长（λmax）为730nm。基于此，本实验所有数据皆在730nm下测定所得。

钼蓝比色法实验条件的确定

根据先后顺序依次加入磷标准溶液，5%钼酸铵溶液，无水乙醇，摇匀，溶液成淡黄色后，加入HCl，再加 L-抗坏血酸，在某温度放置一段时间，在最大吸收波长处测吸光度，做V1—A曲线，确定最优条件，通过单因素和正交实验，最终确定无水乙醇用量为4.0mL、HCl（1：1）为0.5mL、5%钼酸铵用量为0.7mL、L—抗坏血酸为3.0mL。

有机磷转化率的确定

以乐果农药为例，取乐果溶液，分别加入K2S2O8定容，经高压、121℃、恒温30min，使乐果转化为正磷酸。取出后用流水快速冷却，用NaOH溶液调节PH值为6-7。取转化液，按比例加入钼酸铵、无水乙醇、HCl、L-抗坏血酸，定容，60℃恒温水浴，其转化率最大为84.6%。

农药检出限的测定

在乐果农药的转化率为84.6%时，加入不同量的乐果农药，按最优条件实验，按比例加入4%的K2S2O8溶液。经转化后，按比例加入显色剂，60℃恒温水浴30min，流水冷却后，测吸光度值，以此确定该方法对乐果农药的检出限为0.05mg/L。

加标回收率

将洗净称重的卷心菜加入无水硫酸钠，研碎、抽滤、脱色获得蔬菜汁，经检测计算得到该方法对乐果农药的回收率为83.5%。说明该方法在实际检出环境中，能很好的给予检出。

综上所述，本文利用化学发光和分光光度计的方法建立了一个操作简单且不需要昂贵的仪器设备，特别适用于蔬菜中含磷极性有机农药的检测方法。

参考文献：

[1]宫兆晶.基质固相分散-气相色谱法测定油菜籽中有机磷农药残留检测技术研究[R].中国农业科学院硕士论文，2007：1-42.

[2]易承学?薛渊?徐虹等.毛细管气相色谱法测定金针菇中16种农药残留[J].食品工业.2015，36（8）：276—279.

[3]王小瑜?孙霞?王相友等.不同来源酶快速检测有机磷农药的灵敏度比较[J].农业机械学报.2008，39（9）：82-86.

[4]孟玲?翁霞?刘长江.利用植物酯酶快速检测有机磷农药残留的研究进展[J].农药.2006，45（5）：307-308.