马齿苋多糖抑制HepG2细胞存活的作用机制
2019-01-21胡庆娟牛庆川宋皓白书瑜贺文杰李玉萍
胡庆娟,牛庆川,宋皓,白书瑜,贺文杰,李玉萍
(江西科技师范大学生命科学学院,江西南昌330013)
马齿苋(Portulaca oleracea L.)为药食两用的一年 生草本植物,具有神经保护[1-2]、抗菌[3]、抗糖尿病[4-5]、抗氧化[6]、抗炎[7]、抗癌[8-10]等多种功效。研究表明马齿苋中含有生物碱、黄酮、多糖、多巴胺等多种生物活性成分[11-15]。其中,马齿苋多糖(polysaccharide of Portulaca oleracea L.,POP-A)是其主要活性成分之一,具有提高免疫力、抗病毒、降糖调脂、抗癌及抗衰老等生物活性[10,16-23]。
目前对POP抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡已有少量的初步研究。Zhao Rui等[10,18]研究结果表明POP可抑制宫颈癌细胞的增殖,通过参与调控TLR4/NF-kB信号通路,触发DNA损伤,诱导细胞凋亡;崔旻等[24]研究表明POP可以抑制SMMC7721肝癌细胞,增强细胞免疫;王晓波等[25]研究发现POP可以抑制BEL-7402肝癌细胞,提高细胞免疫,具有明显的抑制肿瘤的作用;丁虹等[26]研究结果表明POP能够抑制宫颈癌细胞生长,诱导癌细胞凋亡。但对于HepG2肝癌细胞的研究还鲜见报道。
为此,本研究在课题组前期分离提取马齿苋多糖的基础上,以HepG2肝癌细胞为研究对象,采用体外培养法和四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测了POP-A对HepG2肝癌细胞的抑制作用,同时采用荧光定性定量法、免疫印迹法和反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法探讨了POP-A抑制HepG2肝癌细胞的作用机制,为POP-A抗肿瘤活性的进一步研究提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
马齿苋多糖POP-A按照江西科技师范大学生命科学学院实验室之前的优化条件获取[27]。
改良杜氏伊格尔培养基(dulbecco’s modified eagle’s medium,DMEM)、磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)、焦碳酸二乙酯水(diethylpyrocarbonate,DEPC):美国Gibco公司;……
