何健，廖祖华，李小娟，戴金玉，高益槐

（安发（福建）生物科技有限公司，福建省天然生物活性物质企业重点实验室，福建宁德 352100）

三萜类化合物是灵芝的主要活性成分，研究表明，灵芝三萜酸具有抑制癌细胞增殖、抗病毒、抑菌、解毒保肝等功能[1-4]。通过液体深层发酵获得灵芝三萜酸，具有周期短、含量稳定、组分一致等特点。李平作等[5]在25 L发酵罐进行灵芝深层发酵，分离得到四环三萜酸，命名灵芝酸M1-3，产量是0.36 g/L。旷思敏等[6]通过对发酵条件的优化，摇瓶发酵灵芝三萜酸产量为0.50 g/L。王晓玲等[7]构建了灵芝三萜酸分批发酵的非结构动力学模型，灵芝三萜酸的合成和细胞生长呈现部分偶联关系。

在灵芝的生产放大过程中，种子培养的质量和生物量是重要制约因素[8]。在培养过程中，灵芝孢子生长出菌丝，由菌丝聚集缠绕形成菌丝球。随着菌丝生长和流体流动，菌丝球会增大，并通过菌丝断裂，形成新的菌丝球。生长初期体积小的菌丝球得到充足的氧和营养供应，随着其体积的增大，传递到中心的氧受到限制。由于菌丝球直径超过一定大小后就会产生氧限制，在无氧条件下会形成乙醇，而较长时间的氧限制会导致菌丝球自溶[9]。通过对发酵种子培养的菌丝球进行破碎，可在对数生长期具有更多的生长点、菌丝球获得更充足的氧和营养供应。

本文拟以三萜酸含量为主要指标，对灵芝三萜酸深层发酵的种子培养过程中菌丝球破碎工艺进行研究，为灵芝三萜酸发酵种子的快速扩大培养、生产的规模化提供试验依据。……