李德臣 王志强 孙莹 鞠庆斌

摘要：在对蛋鸡进行血清检测时常抓鸡采血，可这样会给蛋鸡带来应激。现应用检测卵黄抗体来替代检测血清中抗体，以减少产蛋鸡开产后，采样应激造成的产蛋率下降，提高养殖场养殖收入，减少采样难度。

关键词：卵黄抗体;血清抗體;禽流感;蛋鸡

中图分类号：S858.31     文献标识码：B文章编号：2095-9737（2019）11-0017-02

高致病性禽流感是危害养禽业发展的一种严重的急性、接触性、高死亡率的病毒性传染病，世界动物卫生组织将其列为必须报告的动物传染病，我国将其列为一类动物疫病。为做好高致病性禽流感的防控工作，我国将高致病性禽流感作为强制免疫动物疫病，按照年度免疫方案对存栏禽有序开展免疫工作，根据抗体消长规律，适时采集血液样品进行检测，以评估免疫效果。但在实际工作中，采样难是开展监测工作面临的重要问题，尤其是产蛋鸡开产后，采样应激会造成产蛋率下降。笔者与同行专家从实际问题入手，对蛋鸡禽流感卵黄抗体与血清抗体水平进行对比分析，以期解决采样难的问题。

1 试验方法

在本溪市本溪县、桓仁县、明山区、高新区、溪湖区分别选取1个褐壳蛋鸡规模养殖场，编号分别为A、B、C、D、E，每个蛋鸡场选取1批蛋鸡进行试验研究。试验鸡群分别于14日龄、40日龄、100日龄免疫注射重组禽流感病毒（H5N1 Re-8，H7N9 H7-Re-1）灭活疫苗，其他动物疫病免疫按程序开展。160日龄，分别采集同批蛋鸡血清样品和鸡蛋各30份，进行实验室检测。

2 检测方法

按照《高致病性禽流感诊断技术》GB/T18936-2003血凝/血凝抑制试验对卵黄抗体和血清抗体进行检测。

3 检测试剂

禽流感H5（Re-8）抗原和阳性血清;1%红细胞自配。

4 样品制备

4.1 卵黄样品制备

采集新鲜的鸡蛋，用蛋黄分离器分离出蛋黄，并用10 mL注射器将蛋黄吸取1.5～2 mL置于洁净无污染的离心管冷藏备用。

4.2 血清样品制备

用采血器于鸡翅静脉采血5 mL，倾斜45°角，静置，吸取上层血清待用;或者利用离心机以3000 r/min离心5 min，吸取上层血清待用。

5 结果与分析

共检测5个商品蛋鸡场、149份血清样品、149份卵黄样品（其中1个蛋鸡场血清质量差，检测29份，同时检测29份卵黄样品），结果见表1。

5.1 血清抗体与卵黄抗体符合度

抗体水平±1个滴度视为相符。5个蛋鸡场禽流感H5（Re-8）血清抗体和卵黄抗体的符合度最低为93.10%，最高为100%，均超过90%，符合度高度吻合，同时符合度不受地域的影响，所以可以采集鸡蛋对产蛋鸡群进行免疫抗体监测和评估。

5.2 血清抗体与卵黄抗体水平比较

`   按照国家动物疫病监测方案，5个场的卵黄抗体和血清抗体水平均达到国家规定的标准，但5个蛋鸡场中，A场和D场卵黄抗体比血清抗体离散度大，且整体卵黄抗体效价低于血清抗体，这可能与卵黄形成的过程需要9～10天，导致卵黄抗体效价相比血清抗体效价有一定的滞后性有关[1]。

6 讨论与展望

此次试验主要是以H5N1 Re-8株免疫抗体监测为例，且检测的是一个时间点，对于卵黄抗体和血清抗体连续的相关性还需要进一步做细致的、连续的采样检测。

林英等以新城疫、禽流感H5N1 Re-8、禽流感H7N9、禽流感H9免疫抗体为研究对象，对血清抗体和卵黄抗体相关性研究结果表明，血清抗体和卵黄抗体密切相关，但不同疫苗的血清抗体和卵黄抗体相关性并不相同[2]。所以，建议最好对不同疫苗开展卵黄抗体和血清抗体的检测对比，以保证指导防控更加有针对性。

实际生产中，鸡的用途有很多，不仅有蛋用的，还有肉用的，以卵黄抗体进行疫苗效果评估只对产蛋鸡可行，但对于肉仔鸡，非产蛋期蛋鸡不可行。通过卵黄抗体进行疫苗效果评估是一个突破口，希望畜牧兽医同行还能开发出更加便捷、减少禽类应激的疫苗效果评估方法。

参考文献：

[1] 何贤海.禽流感血清抗体和卵黄抗体的比较研究[J].中国畜牧兽医文摘，2015（10）：61.

[2] 林英，王新波，焦玥明，等.蛋鸡血清抗体与卵黄抗体相关性的分析与研究[J].家禽科学，2018（03）：42-43.