张 珂，魏 明，崔晓峰，薛正莲

(安徽工程大学 生物与化学工程学院，安徽 芜湖 241000)

共轭亚油酸(CLA)是亚油酸在空间位置和几何构型上的一系列同分异构体的总称[1]，具有抗肿瘤、抗氧化、防治糖尿病等功能[2-4]，在新型药品、营养添加剂以及功能性食品等领域有重要的应用价值[5-6].生物法合成CLA特异性高，条件温和，但转化率较低[7].因此，对亚油酸异构酶高产菌株的诱变选育及其发酵条件的优化一直是人们工作的重点.

迄今，紫外辐照[8]、亚硝基胍诱变[9]等方法分别被用于油酸异构酶高产菌株的诱变选育，不同程度提升了CLA的产量.常压室温等离子体诱变(ARTP)技术是一种新型的微生物基因组快速诱变技术，具有诱变环境简单，诱变温度低，操作便捷等优点.而对突变株发酵条件的优化一直是人们研究提高CLA产量的基础.本研究以ARTP技术对油酸异构酶产生菌进行多轮诱变选育，并通过单因素及多因素响应面实验对高产突变株的产酶条件进行优化，以获得最佳发酵条件，为生物法生产CLA提供理论基础.

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

嗜酸乳杆菌(L.acidophilus)CICC6075，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心；共轭亚油酸标准品、溶菌酶，Sigma公司；亚油酸(纯度>95%)、正己烷、吐温-80、葡萄糖等常规试剂均为分析纯，购于国药集团化学试剂有限公司.

pH计、分析天平，梅特勒-托利多国际股份有限公司；ARTP育种，无锡思清源生物科技有限公司；紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司；超声波细胞粉碎仪，宁波新芝生物科技股份有限公司；全……