猪伪狂犬病毒gB抗原侧向层析快速检测试纸条的研制
2018-12-21王华俊班付国赵雪丽谢彩华闫若潜王淑娟马震原王东方
王华俊,班付国,赵雪丽,谢彩华,闫若潜,王淑娟,马震原,王东方,王 翠
(河南省动物疫病预防控制中心,河南郑州 450008)
猪伪狂犬病(Porcine pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)引起的猪急性传染病,在猪群中常呈暴发性流行,是危害全球养猪业的重大传染病之一。近年来我国各地均有PR发生,尤其是2010年以来,由PRV基因变异强毒株为主要病原的仔猪流行性腹泻病严重危害了我国养猪业的健康发展,造成新生仔猪大量发病死亡,种猪严重繁殖障碍,育肥猪也有发病死亡[1-5]。该病是世界动物卫生组织(OIE)法定报告动物疫病,是我国的二类动物疫病,也是《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》要求优先净化的疫病之一。
PRV 属于疱疹病毒科(Herpesviridae),其基因组为线性双链DNA,大小约150 kb,基因组编码16种囊膜蛋白。其中gB糖蛋白较为保守,能够诱导产生中和抗体,是免疫保护相关蛋白[6-7]。因此,检测PRV gB抗原是判定猪体内是否存在PRV的重要手段。
目前PRV的检测方法有数字微滴PCR、酶联免疫吸附试验(ELISA)、直接免疫荧光检测方法、液相芯片技术等[8-11]。但这些检测方法因需要特殊仪器设备,操作复杂,耗时耗力或不能快速检测病原等,无法应用于现场快速检测。侧向层析技术,
又称免疫色谱检测,已被广泛应用于激素、过敏原、药物、病毒、细菌等领域的检测分析[12-14],具有操作简便、结果易于判断、成本低廉、敏感性好、特异性强等优点,是以上方法中最便捷的一种[15-16]。本研究采用侧向层析技术和单克隆抗体技术,建立一种简便、快速、敏感,适合现场快速检测和基层推广的PRV检测方法,将对该病净化和根除提供新的检测手段。……
