6种人兽共患病病原核酸液相芯片检测体系的建立
2018-12-21沈家红张磊萍林颖峥李树清
王 艳,沈家红,蒋 蔚,张磊萍,张 强,林颖峥,熊 炜,李树清
(1. 上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心,上海 200135;2. 上海市浦东新区动物疫病预防控制中心,上海 201299;3. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241)
布鲁氏菌病(Brucellosis,以下简称布病)是由布鲁氏菌(Brucella)感染引起的一种全球分布的人兽共患病,主要影响感染宿主泌尿生殖系统,不仅会给畜牧业造成严重的经济损失,还会严重影响人类健康[1-2]。沙门氏菌(Salmonella)是一类人兽共患病原菌[3],广泛分布于自然界中,其中鼠伤寒沙门氏菌是最常见的一种血清型,鼠类可以传播本病。弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染引起的一种高度流行的人兽共患病,可给畜牧业造成严重经济损失[4-5]。狂犬病是由狂犬病病毒属(Lyssavirus,LV)引起的一种高度嗜神经、人和动物都易感的烈性传染病[6]。汉赛巴尔通体(Bartonella henselae)是一种革兰氏阴性棒状短小杆菌,近年来在许多家养和野生哺乳动物中(包括家养犬、猫,野生猫科、犬科动物,啮齿动物和反刍动物)都已检测到[7],人也可感染,因而备受关注。弯曲菌属(Campyolbacter)是20世纪70年代命名的一群革兰氏阴性微需氧的弯曲或螺形菌。研究表明实验动物肠道内也存在弯曲菌感染[8]。
本研究以布鲁氏菌、沙门氏菌、弓形虫、狂犬病病毒、巴氏通体、弯曲杆菌这6种重要人兽共患病病原为对象,基于多重PCR技术的液相芯片检测体系,建立了能同时检测这6种病原的检测方法,并对其灵敏度、特异性等指标进行验证。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
链霉素-亲和素-藻红蛋白(SAPE):购自美国Invitrogen公司;……
