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慢性淋巴细胞白血病患者骨髓INF—γ、IL—2、IL—4、IL—10及IL—1β水平的变化及意义

2018-12-12石沁欧阳红梅宋建新

医学信息 2018年17期
关键词:骨髓细胞因子

石沁 欧阳红梅 宋建新

摘 要:目的 探讨CLL患者骨髓中INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10及IL-1β水平的变化及意义。方法 选取我院初诊CLL患者66例为病例组,根据Binet分期分为BinetA期29例,BinetB期21例,BinetC期16例;選取同期来我院健康体检者30例为对照组,另取38例治疗中的CLL患者为治疗组。应用流式细胞仪分析各组患者骨髓INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β表达,观察在CLL患者不同时期的表达差异。结果 IFN-γ、IL-2表达在CLL各组中均低于对照组(P<0.05),而BinetC期患者表达低于BinetB期(P<0.05),BinetB期低于BinetA期(P<0.05),与Binet分期呈负相关。INF-γ、IL-2在CLL治疗后虽高于BinetA期,但P>0.05,而低于对照组(P<0.05)。IL-4、IL-10、IL-1β表达高于对照组(P<0.05),BinetB期高于BinetA期(P<0.05),BinetC期高于BinetB期(P<0.05),与Binet分期呈正相关。治疗后IL-4、IL-10、IL-Iβ与BinetA期比较有所降低,但P>0.05,与对照组比较仍高于对照组(P<0.05)。结论 CLL患者骨髓微环境细胞因子表达紊乱,Th1类细胞因子INF-γ、IL-2随着CLL Binet分期的进展逐渐减低,IL-4、IL-10、IL-1β则逐渐增高,与CLL的发生、发展相关。

关键词:慢性淋巴细胞白血病;骨髓;细胞因子

中图分类号:R733.72 文献标识码:A DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2018.17.047

文章编号:1006-1959(2018)17-0149-03

Abstract:Objective To investigate the changes and significance of INF-γ,IL-2,IL-4,IL-10 and IL-1β in marrow of CLL patients.Methods 66 patients with newly diagnosed CLL in our hospital were selected as the case group.According to Binet stage,there were 29 cases of BinetA stage,21 cases of BinetB stage and 16 cases of BinetC stage.30 cases of healthy physical examination in our hospital were selected as control group.The CLL patients in the treatment group were the treatment group.Another 38 patients with CLL under treatment were treated.The expressions of INF-γ,IL-2,IL-4,IL-10 and IL-1β in marrow of each group were analyzed by flow cytometry,and the expression differences in different periods of CLL patients were observed.Results The expressions of IFN-γ and IL-2 in CLL group were lower than those in control group(P<0.05),while those in BinetC stage were lower than BinetB stage(P<0.05),and BinetB stage was lower than BinetA stage(P<0.05),negatively correlated with Binet staging.INF-γ and IL-2 were higher than the BinetA phase after CLL treatment,but P>0.05,which was lower than the control group(P<0.05).The expressions of IL-4, IL-10 and IL-1β were higher than those of the control group(P<0.05),the BinetB phase was higher than the BinetA phase(P<0.05), the BinetC phase was higher than the BinetB phase(P<0.05),positively correlated with Binet staging.After treatment,IL-4,IL-10,IL-Iβ and BinetA phase were decreased,but P>0.05,which was still higher than the control group(P<0.05).Conclusion The expression of cytokines in bone marrow microenvironment of patients with CLL is disordered.The cytokines of Th1 type cytokines INF-γ and IL-2 decrease with the progression of CLL Binet stage,and IL-4,IL-10 and IL-1β gradually increase,and CLL occurrence and development are related.

Key words:Chronic lymphocytic leukemia;Marrow;Cytokines

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是以成熟B淋巴细胞克隆性增殖且肿瘤细胞凋亡受阻、生存期延长为特征的异质性恶性疾病[1]。目前认为CLL的发病机制与免疫异常有关,免疫功能紊乱在其发生、发展过程中起着重要作用[2]。细胞因子是一类小分子分泌蛋白,也是机体免疫系统的重要组成部分,在维持骨髓微环境乃至全身免疫稳态中发挥重要作用。本文应用流式细胞仪检测CLL不同分期及治疗后骨髓微环境中INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10及IL-1β水平的变化,探讨肿瘤微环境中细胞因子在CLL发生、发展中的意义。

1资料与方法

1.1一般资料 选取2014年12月~2018年4月临沧市云县人民医院血液科门诊及住院收治的CLL患者66例为病例组,本研究征得所有受试者知情同意。其中男39例,女27例,年龄49~84岁,平均年龄(67.53±15.48)岁。根据Binet分期将患者分为BinetA期29例,BinetB期21例,BinetC期16例。选取同期来我院健康体检者30例为对照组,其中男18例,女12例,年龄48~76岁,平均年龄(61.51±12.64)岁。另取随访过程中38例符合中国慢性淋巴细胞白血病的诊断与治疗指南(2011版)[3]的患者予以治疗,作为治疗组。各组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2主要试剂与仪器 INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β试剂盒购自BD公司。流式细胞仪为Beckman Coulter公司FC500。

1.3方法

1.3.1标本采集 常规骨髓穿刺,抽取骨髓液2.0 ml EDTA抗凝,3000 r/min离心30 min,收集上清,-80 ℃冻存待测。

1.3.2 INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β检测 按照试剂盒说明书设计流式细胞术方案,绘制标准曲线;计算所需微球量,混合微球,以1500 r/min离心10 min,弃上清,加入丢弃上清相同量的增强剂混合待用。取试管编号,每管加入20 μl离心后的骨髓上清液、混合微球50 μl及PE染料50 μl,避光孵育3 h,加入wash buffer液600 ml混匀,1500 r/min离心10 min,弃上清,加入300 μl wash buffer液混勻上机检测,用FCAP分析软件分析。

1.4统计学处理 应用SPSS19.0统计软件进行分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,应用Pearson行相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β在各组CLL中的表达 与对照组相比,INF-γ、IL-2在CLL各组中均减低,差异具有统计学意义(P<0.05);而BinetC期患者表达低于BinetB期,BinetB期低于BinetA期(P<0.05);INF-γ、IL-2在CLL治疗后虽高于BinetA期,但差异无统计学意义(P>0.05),而低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。IL-1β、IL-4、IL-10在CLL各组表达高于对照组(P<0.05),BinetB期高于BinetA期(P<0.05),BinetC期高于BinetB期(P<0.05);治疗后IL-Iβ、IL-4、IL-10与BinetA期比较有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05),与对照组比较仍高于对照组(P<0.05),见表1。

2.2 IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ、IL-1β在CLL各组中的相关性 在BinetA期、BinetB期、BinetC期中IFN-γ、IL-2与CLL的分期呈明显负相关(r=-0.242、-0.304、-0.164、-0.231、-0.179、-0.207,P<0.05),IL-4、IL-10、IL-1β与疾病的分期呈正相关(r=0.846、0.793、0.629、0.751、0.637、0.892、0.749、0.717、0.673,P<0.05)。

3讨论

CLL是具有高度异质性的恶性疾病,同为CLL的患者,由于分期不同,其预后也不尽相同。有研究表明,在CLL微环境中产生的细胞因子水平的变化,细胞因子的多效性、重叠性作用及平衡关系,决定着CLL的严重程度[4]。在对急性白血病和慢性粒细胞白血病的研究中发现,患者血清或骨髓微环境中IL-2、INF-γ水平明显减低,且与患者病情进展及预后呈负相关;Th2类细胞因子及IL-1β病情进展及预后呈正相关[5-7]。

本次研究结果显示,CLL骨髓Th1类细胞因子IL-2、INF-γ低于对照组,随着CLL疾病Binet分期进展,IL-2、INF-γ水平逐渐降低且与Binet分期呈负相关,即对照组>BinetA期>BinetB期>BinetC期;而Th2类细胞因子IL-4、IL-10及多功能炎性因子IL-1β则高于对照组,而随着CLL疾病Binet分期进展进一步增高且与Binet分期呈正相关,即对照组

综上所述,INF-γ、IL-2随着CLL Binet分期的进展逐渐减低,IL-4、IL-10、IL-1β则逐渐增高,与CLL的发生、发展相关。

参考文献:

[1]Hojjat-Farsangi M,Jeddi-Tehrani M,Razavi SM,et al.Immunoglobulin heavy chain variable region gene usage and mutational status of the leukemic B cells in Iranian patients with chronic lymphocytic leukemia[J].Cancer Sci,2009,100(12):2346-2353.

[2]D'Arena G,Simeon V,Auria F,et al.Regulatory T-cells in chronic lymphocytic leukemia:actor or innocent bystander[J].Am J Blood Res,2013,3(1):52-57.

[3]中华医学会血液学分会.中国慢性淋巴细胞白血病的诊断与治疗指南(2011年版)[J].中华血液学杂志,2011,32(7):498-501.

[4]Kiaii S,Kokhaei P,Mozaffari F,et al.T cells from indolent CLL patients apoptosis of leukemic B cells in vitro and have altered gene expression profile[J].Cancer Immunol Immunother,2013,62(1):51-63.

[5]姜煥好,曾东良,吴春凤,等.急性白血病患者治疗前后血清 INF-γ、VEGF、IL-10及IL-12水平的变化及意义[J].医学综述,2012,1(2):299-300.

[6]宋建新,张芹,梅芬,等.慢性粒细胞白血病患者骨髓部分细胞因子的表达及意义[J].国际检验医学杂志,2016,12(23):3255-3257.

[7]宋建新,欧阳红梅,闻艳,等.慢性粒细胞白血病骨髓巨噬细胞表达与细胞因子的相关性[J].广东医学,2017,3(5):1-5.

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[9]Mantovani A,Garlanda C,Allavena P.Molecular path-ways and targets in cancer-related inflammation[J].Ann Med,2010,42(3):161-170.

收稿日期:2018-6-11;修回日期:2018-6-25

编辑/王海静

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