刘慧方

（梅州市人民医院检验科，广东 梅州 514000）

血脂水平与载脂蛋白E（apolipoprotein E，Apo E）基因多态性存在相关性，与冠心病和动脉粥样硬化的发生密切相关[1]。ApoE基因位于19号染色体，具有明显的基因遗传多态性，有3种主要的异构体即E2、E3、E4，其分别由1个基因位点的3个等位基因ε2、ε3、ε4编码。在普通人群中存在 6 种基因型：3 个纯合子（E2/ E2、E3/ E3、E4/ E4），3 个杂合子（E2/ E3、E2/ E4、E3/ E4）。按组分为E2型（E2/E2，E2/E3）、E3型（E3/ E3，E2/ E4）、E4型（E3/E4，E4/E4）。本研究通过对ApoE基因多态性和血脂水平变化的研究，以探讨针对ApoE基因型变化而制定个体化治疗方案。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2016年1—12月梅州市人民医院高脂血症患者总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三脂（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）其中一项异常增高的142例，其中男100例、女42例，年龄45～86岁。排除合并周围血管疾病或周围血管栓塞性疾病者、大动脉炎、血液病 、结核 、恶性肿瘤、严重肝肾功能不全、入院前1周内使用降脂药物者。

1.2 仪器与试剂

DNA提取试剂盒购自北京天根公司，TC-96型PCR仪购于杭州博日科技有限公司，MK100-2A型杂交仪及ApoE基因型检测试剂盒（基因芯片法）购自珠海赛乐奇生物技术有限公司，AU5400全自动生化分析仪购自日本奥林巴斯公司，TC、TG、LDL-C检测试剂盒购自北京中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 方法

抗凝血标本采用乙二胺四乙酸二钾抗凝，用于ApoE基因分型检测。血清标本用于血脂水平检测。血液标本置于-20 ℃冰箱中冻存。按试剂盒说明书提取全血基因组DNA，ApoE基因进行扩增，随后将扩增产物进行杂交，对ApoE基因行分型检测，基因芯片的位置设置见图1。同时测定不同ApoE基因型血清标本的TC、TG、LDL-C水平，所有操作均按照试剂盒说明书进行。……