和绘华 郑瑞

【摘 要】目的：对手工法双相血培养和BacT/Alert 3D全自动血培养仪在新生儿血培养的检出结果作回顾性分析。方法：对2009-2011年使用手工双向血培养瓶的432份血标本与2016-2018年使用全自动血培养仪的663份血标本进行细菌阳性检出率、检出时间、检出种类的比较。结果：432例双向血培养瓶阳性11例，阳性率为2.55%，污染率1.15%。663例全自动血培养仪阳性30例，其中与临床医生沟通符合病人临床体征，有临床意义的病原菌24株，阳性率为4.52%；污染率0.90%，48小时两种血培养方法阳性菌构成比：手工法革兰氏阳行球菌占67%，仪器法占73%。结论：在新生儿血培养中，BacT/Alert 3D全自动血培养仪的阳性率高，检出时间短（一般阳性标本在48小时内可自动报阳性最早可在培养后6-12小时报阳性，24小时报阳性率较高），细菌检出种类增多，提高了血培养的送检数。

【关键词】新生儿；血培养；手工双向血培养瓶；全自动血培养仪；病原菌

【中图分类号】R25.36 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2018）09--01

新生儿免疫功能尚处于完善阶段，难以完全抵抗分娩时及产后接触的所有病原菌，常因此发生血流感染甚至败血症等疾病[1]，增加其致死风险。临床研究证实，新生儿分娩后行血培养及药敏试验，可提高其早期疾病检出率，使治療更具针对性与预见性，对提升新生儿存活率及生存质量有意义重大。随着全自动微生物标本接种仪的相继问世，因其标本接种速度快，操作误差少，菌落分辨率高，检测周期短等优点，逐步受到微生物检验人员和临床医师的认可。本文通过收集2009-2011年使用手工双向血培养瓶的432份血标本与2016-2018年使用全自动血培养仪的663份血标本进行细菌阳性检出率、检出时间、检出种类的比较。对其作回顾性分析。

1 材料与方法

1.1 标本来源 1095例血培养标本来自于2009年7月至2018年3月在本院就诊的住院患者。

1.2 仪器与试剂血培养瓶：郑州安图生物工程股份有限公司生产的手工双相血培养瓶（需氧菌或兼性厌氧菌，以下称手工血瓶）；法国生物梅里埃公司生产的BacT/Alert3D。培养瓶：中和抗生素需氧瓶（FA瓶）、厌氧瓶（SN瓶）以及中和抗生素儿童瓶（PF瓶）。培养基：法国生物梅里埃公司生产的哥伦比亚血平板、巧克力平板，杭州天河微生物试剂公司生产的麦康凯干粉培养基。ATB-Expression细菌鉴定及配套药敏条，全自动血培养仪BacT/Alert3D240，V1TEK2compact细菌鉴定仪及配套药敏卡，均为法国生物梅里埃公司生产。质控菌株：标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC29213、大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853和粪肠球菌ATCC292120

1.3 方法

1.3.1 手工血培养以无菌操作取静脉血5-8 mI.注入手工血瓶中，摇匀，放置35℃温箱，每天上午、下午两次观察液体及固体培养基上有无细菌生长，如有细菌生长，涂片染色并转种血平板、巧克力和麦康凯平板，使用ATB-Expression细菌鉴定及药敏试验；连续培养7d无细菌生长，报告阴性。

1.3.2 仪器法按照BacT/Alert3D240。血培养仪标本采集量的要求，采集患者血液后注入相应的培养瓶，成人加入FA和SN瓶，儿童加入PF瓶，仪器报警阳性，进行涂片镜检并转种，若有细菌生长为阳性，用VITEK2compact全自动细菌鉴定仪鉴定及药敏；5 d无阳性报警，报告为阴性；当仪器提示阳性，涂片培养均未见细菌为假阳性，污染菌按照《临床微生物实验室血培养操作规范》川及《实验室对血培养污染的评估方案》[2]的依据判读。

1.4 统计学 处理采用SPSS19.0软件进行统计学处理，计数资料以率表示，组间比较采用检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种培养瓶阳性检出率比较2009-2011年使用手工双向血培养瓶的432份血标本与2016-2018年使用全自动血培养仪的663份血标本进行细菌阳性检出率、检出时间、检出种类的比较。结果：432例手工血培养阳性11株，阳性率为2.55%，污染率1.25%，663例全自动血培养48 小时内分离出30株病原菌，其中有临床意义的病原菌24株，阳性率为4.52%；污染率0.90%；二者阳性率差异无统计学意义（P>0.05）。48小时两种血培养方法阳性检出率细菌构成比（%）：手工法革兰氏阳行球菌占67%，仪器法占73%。

2.2 48 小时内两种血培养方法细菌阳性检出率比较：使用仪器法对于检出阳性率，革兰氏阳性球菌检出率均高于手工方法。结果见表2

3 讨论

3.1阳性率结果的比较分析本研究中手工法与仪器法血培养阳性率分别为2.55%和4.52%，二者有差异，但异无统计学意义（P>0.05 ）。仪器法的阳性率远远低于龚兴旺报道的血培养15.1%阳性率[3]。

3.2两种方法中均以革兰阳性球菌为主要病原菌，这一结果提示，对新生儿的产后致病菌预防可将革兰阳性球菌作为重点关注对象，此类菌株多具有耐药性强、药物耐受范围广等特点，对新生儿生命健康安全威胁极大。本次检出的病原菌，以金黄色葡萄球菌、肠球菌、大肠埃希菌及表皮葡萄球菌检出率最高，分别达到32%，22%，21%和17%，表明上述四类菌株在新生儿病原菌感染中最为常见，需引起临床医师重视。

参考文献

宋海英，承晓京，张文蓉，等.新生儿血培养的病原菌及耐药性分析.检验医学，2012，27（7）：540-543.

中华医学会检验医学分会.临床微生物实验室血培养操作规范[S].北京：中华人民共和国卫生部，2012.

龚兴旺，周永，白梅，等.应用全自动血培养仪提高血液、无菌体液培养阳性率的临床观察[J].黔南民族医专学报，2015，28（1）；32-33.