杨 勇，刘 群，章帅文，李昆太

(江西农业大学生物科学与工程学院，江西南昌330045)

维生素B12(Vitamin B12)又叫钴胺素，属于咕啉类化合物，是唯一含金属的维生素类化合物[1]。作为一种重要的生物活性物质，维生素B12是许多重要生物化学反应所必需的辅酶[2]，其参与的生化反应过程包括了DNA的合成和调控、脂肪酸的合成、氨基酸的代谢及能量的产生等[3]。目前，维生素B12主要用于治疗恶性贫血症以及末梢神经炎[4]。

由于维生素B12的分子结构极为复杂，其全部化学合成需要多达70余个的反应步骤[5]，且成本昂贵，故目前几乎都是通过微生物发酵的方式来生产维生素B12[6]。自然界中，维生素B12的生物合成存在两种不同的合成途径，即好氧途径与厌氧途径[7]。这两种合成途径的本质区别在于钴离子螯合到咕啉环的时机不同以及中心咕啉环的缩合机制不同[8]。脱氮假单胞杆菌由于具有完整的维生素B12合成基因，可在好氧的条件下完成维生素B12的全合成，因而被广泛开发应用于维生素B12的发酵生产[9]。

假单胞菌属(Pseudomonassp.)就是一类典型的具有ED代谢途径的微生物，如嗜糖假单胞菌(P.Saccharophila)[10]，恶臭假单胞菌(P.putida)[11]、荧光假单胞菌(P.fluorescens)[12]等。有研究表明，假单胞菌属对胞内氧化环境较为敏感，其ED代谢途径所产生的NADPH对于增强菌体对抗氧化应激(oxidative stress)反应的能力发挥着重要的作用[13]。例如，Singh等[14]在荧光假单胞菌培养过程中外源添加100 μmol/L的超氧生成剂甲萘醌(menadione)，结果表明菌体在氧化应激状态下会显著抑制NAD+激酶(NAD+kinase，NADK)的酶活，并增强 NADP+磷酸酶(NADP+phosphatase，NADPase)的酶活，以增加胞内NADPH 的供给并限制NADH 的合成。……