李海琴，康昭风，谭美芳，曾艳兵，季华员

(江西省农业科学院畜牧兽医研究所，江西南昌330200)

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性传染病，临床上主要表现为妊娠母猪流产、产死胎、木乃伊胎及弱仔，新生仔猪出现明显的神经症状以及腹泻死亡，育肥猪突然发热和呼吸道等症状[1]，是危害养猪业最严重的传染病之一。PRV基因组序列测定发现其由72个阅读框组成，编码70种蛋白[2-4]。伪狂犬野毒包括有gE、gB、gI、gG、TK等基因，其中gE基因是PRV的主要毒力相关基因[5]，也是世界动物卫生组织所规定基因缺失疫苗的首选缺失基因，伪狂犬野毒抗体包含上述所有基因对应的抗体，我国用于预防猪伪狂犬病的疫苗主要是gE基因缺失的疫苗，配套使用gE缺失疫苗的猪场，使用PRV gE基因抗体检测试剂盒能够方便、快速、准确检测PRV野毒抗体，从而评价猪群PRV野毒感染状况[6]；gB抗体ELISA检测，可以了解猪场接种猪伪狂犬疫苗后的免疫保护情况，若gB-ELISA 抗体检测为阴性，则说明猪群不受免疫保护。近几年来全国主要养猪地区均不同程度出现规模猪场猪伪狂犬病转阳病例[7-8]，引起行业内高度的关注。江西是个养猪大省，规模化猪场数量较多，迫切需要对江西省规模化猪场猪伪狂犬病的流行现状进行跟踪与调查，为此，本研究对2016—2017年江西部分地区规模化猪场进行PRV抗体分析，初步分析了PRV抗体在不同年份、不同区域、不同猪群和不同季节的感染状况。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 被检血清来自江西部分地区(南昌、九江、吉安、新余、东乡、抚州、赣州、上饶)的规模化猪场，其中哺乳仔猪(0～30日龄)、保育仔猪(30～70日龄)、生长育肥猪(70～180日龄)、后备猪为180日龄以后至配种前、母猪是能繁母猪、公猪为成年公猪，送检猪场都免疫PRV gE缺失疫苗。

1.1.2 样品采集与处理 2016年1月—2017年12月，在江西省不同地区的32个猪场共采集样本1 820份，血清的采集方法是每只猪耳静脉采集全血1 mL装于2 mL灭菌离心管中。猪伪狂犬gE、gB抗体ELISA检测试剂盒，购自美国IDEXX公司。

1.2 试验方法

按常规方法分离所得血液的血清，然后按试剂盒的使用说明书进行样品的处理及检测。

2 结果与分析

2.1 不同年份江西省PRV gE抗体监测情况

由表1可知，在监测的32个规模猪场中，2016年监测猪场数为16个，血清样品为901份，PRV gE抗体阳性场数为11个，抗体阴性场数为5个，场阳性率为68.8%(11/16)；PRV gE样品阳性数为362份，样品阳性率为40.1%(362/901)。2017年监测猪场数为16个，血清样品为919份，PRV gE抗体阳性场数为10个，抗体阴性场数为6个，场阳性率为62.5%(10/16)；PRV gE样品阳性数为318份，样品阳性率为34.6%(318/919)。

2.2 江西省不同地区PRV血清学检测结果

由表2可知，本研究从江西省南昌、九江、吉安、赣州、新余、上饶、宜春、抚州8个地区的32个规模化猪场采集血清样品，PRV gE抗体检测结果显示江西地区猪伪狂犬gE抗体总的阳性率为37.4%，九江市gE抗体阳性率最高，达到52.2%；其次依次为抚州、宜春、南昌、赣州、吉安、新余；上饶市gE抗体阳性率最低，为13.2%。PRV gB抗体检测结果显示gB抗体总阳性率为93.2%，南昌和赣州PRV gB抗体阳性率最高，为97.8%；其次依次为新余、九江、抚州、宜春、吉安；上饶地区的gB抗体阳性率最低，为74.7%。

表1 不同年份江西省PRV gE抗体检测结果

表2 江西省不同地区PRV gE、gB抗体检测结果

2.3 不同阶段猪群PRV血清学检测结果

从不同阶段猪群PRV gE抗体阳性率结果(表3)来看，育肥猪的PRV gE阳性率最高(48.9%)，其次为母猪(44.2%)和公猪(35.8%)，依次是哺乳仔猪(33.5%)和后备猪(32.7%)，保育猪的阳性率最低(29.2%)；PRV gB抗体阳性率最高的是公猪(98.2%)，其次是哺乳仔猪(97.4%)和母猪(95.7%)，依次是后备猪(93.6%)和保育仔猪(87.6%)，育肥猪最低为(82.5%)。

表3 江西省不同阶段猪群PRV gE、gB抗体检测结果

2.4 不同季度PRV血清学检测结果

对不同季度规模猪场PRV gE抗体阳性率进行统计，结果(表4)显示，4个季度的PRV gE阳性率均在30%以上，其中第四季度PRV gE抗体阳性率最高(43.0%)，第三季度PRV gE抗体阳性率最低为30.5%；其中第四季度PRV gB抗体阳性率最高(94.4%)，第三季度PRV gB抗体阳性率最低为92.1%。

表4 2016—2017年江西省不同季度PRV gE、gB抗体检测结果

3 小结与讨论

本研究通过对江西省不同地区32个规模化猪场的1 820份血清进行了猪伪狂犬血清学调查，2016年与2017年被调查的猪场gE抗体阳性率分别为68.8%和62.5%，因为送检猪场均免疫PRV gE缺失疫苗，使用PRV gE基因抗体检测试剂盒能够准确检测PRV野毒抗体，从而评价猪群PRV野毒感染状况，被检猪场gE抗体阳性率结果说明江西省猪伪狂犬野毒感染已十分普遍，2016年与2017年血清样品gE抗体阳性率分别为40.1%和34.6%，PRV gE抗体总阳性率达37.4%，这比前期对江西省猪伪狂犬野毒感染的血清学调查结果更高[9-10]，结果表明江西省猪伪狂犬野毒感染已更严重。

从江西省8个地区采集的样品检测PRV感染的情况来看，九江市、抚州市、宜春市、南昌市和赣州市PRV gE抗体阳性率都较高，吉安市、新余市，上饶市PRV gE抗体阳性率较低；不同地区检出率的差异与区域内猪场的疫苗种类，免疫程序，养殖密度，生物安全等诸多因素有关。

从不同阶段猪群gE抗体阳性率来看，哺乳仔猪和保育仔猪PRV gE抗体阳性率偏低，这可能是受母源抗体的干扰，据报道，母猪产前30 d免疫伪狂犬疫苗，其仔猪30日龄时获得母源抗体合格率为93.33%以上，且母源抗体可以维持到60日龄[11]；而随着日龄增长，生长育肥猪的感染率显著增高(48.9%)，原因可能是育肥猪舍的消毒卫生和生物安全工作较差，这也是育肥猪感染率居高不下的重要原因，结果提示商品猪的伪狂犬疫苗免疫也是猪伪狂犬防控和净化的关键环节；公猪和母猪及后备猪的PRV野毒感染率也较高，均在30%以上，种猪野毒阳性率居高不下，容易造成猪场内猪伪狂犬病毒循环传播。

2016—2017年4个季度的PRV gE抗体阳性率均在30%以上，其中第四季度gE抗体阳性率最高(43%)，说明猪伪狂犬病四季都可能发生，没有明显的季节差异性，但以冬季较为多发，这与其他研究结果一致[12-14]。监测结果表明气候也是影响猪伪狂病野毒感染的因素之一，可能原因是低温有利于病毒存活，冬季寒冷，猪舍内通风不良，易导致有害气体聚集，易于病毒的传播。

猪伪狂犬病gB抗体检测结果显示，南昌和赣州地区PRV gB抗体阳性率最高(97.8%)，但PRV gE野毒感染率也较高，分别为42%和35.2%；宜春地区的PRV gB抗体阳性率相对较低(93.4%)，gE抗体阳性率却高为47.3%；公猪的PRV gB阳性率最高(98.2%)，但是公猪的PRV gE野毒感染率也较高，这种现象表明较高的gB抗体阳性率不能说明猪群未受到伪狂犬野毒的感染。

2012年国务院办公厅颁布的《国家中长期动物疫病防治规划2012—2020》中要求，到2020年全国所有种猪场猪伪狂犬要达到净化标准，面对我省如此严峻的伪狂犬流行情况，净化猪伪狂犬病已迫在眉睫。疫苗免疫接种是预防和控制猪伪狂犬病的根本措施，我们需要制定科学的免疫方案，配合抗体检测验证免疫效果，采取严格的生物安全措施，并做好消毒工作及血清学监测工作，加强猪场饲养管理，严格把好引种关，争取在2020年达到净化标准。